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AM(人腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移))
生長培養(yǎng)基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶


貼壁細胞傳代培養(yǎng):
1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。
2. 加入1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3至5分鐘(此處為12.5 cm2培養(yǎng)瓶所用體積,可根據(jù)實際情況增減用量)。
3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落,并使細胞分散。
4. 離心200x g/5 min,去除上清后,取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸,取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中,并加入新鮮細胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。
5. 將細胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代比例:建議 1:6 至 1:9
培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。
懸浮細胞傳代培養(yǎng):
懸浮細胞的傳代可通過補加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來完成,具體做法如下:
1. 取出少量細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測,當細胞密度達到1×106 cells/mL 時,進行細胞傳代培養(yǎng)。
2. 取足量細胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,將細胞密度維持在2-3×105cells/mL。
3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度,則進行傳代培養(yǎng)。
培養(yǎng)基換液: 每隔2至3天。
注意:培養(yǎng)瓶應(yīng)使用帶濾膜瓶蓋以保持培養(yǎng)基與空氣和CO2
拆包 & 存儲:
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
注意:如為凍存管,請收到后立即解凍培養(yǎng)
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟:
對于貼壁培養(yǎng)的細胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細胞的脫落。
1. 收到細胞產(chǎn)品后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因在運輸過程中存在顛簸,且有些細胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細胞脫落漂浮的情況,這些細胞仍是活細胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。
2. 對于貼壁培養(yǎng)的細胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基,至剩余5-8mL左右,隨后將細胞置于含有5% CO2的37℃恒溫 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶,請立即傳代。
3. 對于懸浮培養(yǎng)的細胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中,離心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于含有5% CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存細胞操作步驟:
注意:為保存細胞的高存活率,請收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中, 離心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。
5. 將細胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞產(chǎn)品的售后政策:
1、收到細胞24小時內(nèi)出現(xiàn)細菌、真菌、霉菌污染,72小時檢測支原體陽性無條件重發(fā);
2、享有1個月的超長售后免責期;
3、1個月內(nèi),如果第三方鑒定STR錯誤,可退細胞款項。
4. 細胞運輸途中遭遇的問題:丟件、瓶身破損、培養(yǎng)液滲漏;
5. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品24小時內(nèi),給我們提供真實有效實驗結(jié)果,供核實;
6. 常溫發(fā)貨的細胞經(jīng)過24小時靜置后,有大部分細胞未存活(需提供真實、清晰的細胞狀態(tài)照片)
7. 干冰凍存管發(fā)貨的細胞復蘇之后,有大部分細胞未存活(需提供真實、清晰的細胞狀態(tài)照片);
關(guān)鍵字: AM;人腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移);
上海鈺博生物科技有限公司是2012年5月由“海歸”組成的創(chuàng)業(yè)團隊與兩個專業(yè)投資機構(gòu)發(fā)起成立的,以
開發(fā)生產(chǎn)科研試劑和特色檢驗產(chǎn)品為方向,經(jīng)過兩年多的努力,已經(jīng)建立了免疫學和分子生物學的五個技術(shù)平臺,開發(fā)了ELISA/ELISpot酶聯(lián)免疫試劑盒、重組蛋白、熒光標記抗體、四聚體(Tetramer)特異性T細胞檢測試劑盒、Aimplex流式高通量多因子檢測、microRNA表達譜分析和功能研究等系列產(chǎn)品和服務(wù),與國內(nèi)外免疫學、干細胞、傳染病和腫瘤研究及臨床檢驗領(lǐng)域的科學家們建立了良好的合作關(guān)系,形成了一定的品牌影響力。鈺博生物另建有七大技術(shù)服務(wù)平臺(ELISA定制服務(wù),免疫學檢測服務(wù)、分子生物學技術(shù)服務(wù)、蛋白表達與純化技術(shù)服務(wù)、抗體制備技術(shù)服務(wù)、細胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、整體實驗課題服務(wù)。用專業(yè)的知識、專業(yè)的設(shè)備、專業(yè)的態(tài)度為客戶提供一站式實驗技術(shù)服務(wù)!