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檢測原理 | 細(xì)胞增殖檢測廣泛應(yīng)用于細(xì)胞活性、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的評價(jià)中,直接檢測細(xì)胞中的DNA合成被認(rèn)為是最精確的檢測細(xì)胞增殖的方法。最初廣泛使用的檢測細(xì)胞中DNA合成的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性較差。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng),無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級換代的新方法,將會逐步取代BrdU法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是胸腺嘧啶脫氧核苷類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸腺嘧啶脫氧核苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與熒光標(biāo)記的小分子疊氮化物探針(如FITC Azide、Elab Fluor? 488 Azide、Elab Fluor? 594 Azide、Elab Fluor? 647 Azide),通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Click reaction)。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的熒光探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臒晒鈾z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。 |
檢測方法 | 熒光法;流式 |
樣本類型 | 細(xì)胞 |
檢測時(shí)間 | 2 hours |
檢測儀器 | 流式細(xì)胞儀 |
熒光 | FITC |
Ex/Em | 490/530 |
Channel set | FITC |
自備試劑 | PBS(含1%BSA)緩沖液(pH7.2-7.4),PBS(含1% Saponin)緩沖液(pH7.2-7.6),4%多聚甲醛(溶劑為PBS,pH7.2-7.6)(E-IR-R113),雙蒸水 |
保存溫度 | 該產(chǎn)品可在-20°C避光條件下保存12個(gè)月。 |
有效期 | 12個(gè)月 |
運(yùn)輸條件 | 冰袋 |

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