DNS 試劑（NY/T 法）
簡介：
植物體內(nèi)的碳素營養(yǎng)狀況以及農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)形狀，常以糖含量作為重要指標(biāo)。單糖和某些寡糖(如麥芽糖)含有游離的醛基或酮基，具有還原性，屬于還原糖；多糖和蔗糖等屬于非還原糖?？梢岳枚嗵悄鼙凰?/span>水解為單糖的特性通過測定水解后的單糖含量對總糖進(jìn)行測定。
伊勢久植物總糖和還原糖檢測試劑盒(硝基水楊酸法)檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物 。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系 ，在540nm處測定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系，利用比色法和標(biāo)準(zhǔn)曲線測得樣品中的還原糖和總糖的含量 。本試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
組成：
產(chǎn)品名稱 | KB001- 100mL | KB001-500mL | Storage |
DNS 試劑（NY/T 法） | 100mL | 500mL | 4℃ 避光 |
說明書 | 一份 |
保存條件：
4℃避光保存，6個(gè)月內(nèi)有效。
自備材料：
1 、 蒸餾水、6M鹽酸溶液 、6M氫氧化鈉溶液
2 、 50mL離心管
3 、 離心機(jī)
4 、 水浴鍋或恒溫箱
5 、 分光光度計(jì)、比色皿
6 、 勻漿器或研缽
I2-KI溶液：稱取5g碘和10g碘化鉀，溶于100ml蒸餾水中。
葡萄糖（Glu） 標(biāo)準(zhǔn)液：1mg/mL
操作步驟(僅供參考)：
1 、 還原糖的提?。?/span>
①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3mL勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12mL蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②50℃水浴30min，并不時(shí)攪拌， 以便還原糖徹底浸出。
③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50mL離心管，4000g離心5min。
④留取上清液， 向沉淀中加入20mL蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。
⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100mL (提取液)，混勻，作為還原糖待測液。
2 、 總糖的水解和提?。?/span>
①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3mL勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12mL蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②向容器中加入10mL 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌。
③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液（建議I2-KI溶液，濃度見說明書第一頁自備材料項(xiàng)下），檢查水解是否完全，如已經(jīng)水解完全則不顯示藍(lán)色。
④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液 pH 至 7.4 ，用蒸餾水定容至100 mL，混勻，4000g離心5min或過濾。
⑤取上清或?yàn)V液10mL，用蒸餾水定容至100mL，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取1mL總糖水解液，測定其還原糖的含量。
3 、制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：取干凈離心管或試管，按下表進(jìn)行操作，以0號調(diào)零，檢測540nm處吸光度， 以吸光度值為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
加入試劑 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Glu 標(biāo)準(zhǔn)(1mg/mL) | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
蒸餾水(mL) | 1.0 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
DNS 檢測液(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
沸水浴中準(zhǔn)確煮沸 5min，取出， 自來水冷卻至室溫。 |
蒸餾水(mL) | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 |
相當(dāng)于葡萄糖量(mg/mL) | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
4、總糖及還原糖測定：取制備好的還原糖提取液或總糖水解液1mL，分別加入DNS試劑2mL，其余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作，于540nm處測定各管的吸光度。
計(jì)算：
還原糖的百分含量：
還原糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs) × 100
總糖的百分含量：
總糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs) × 100× 10×0.9
式中：C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的糖量(mg/mL)
VT=提取液的體積(mL)
m=植物樣品的質(zhì)量(mg)
Vs=測定時(shí)用的樣品體積(mL)
注意事項(xiàng)：
1 、上述低溫試劑應(yīng)避免反復(fù)凍融，并避光保存， 以免失效或效率下降。
2 、待測樣本如不能及時(shí)測定，應(yīng)置于 2~8℃保存，3 天內(nèi)穩(wěn)定。
3 、如果樣品還原糖濃度過高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
4 、總糖計(jì)算公式在測定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對總糖含量很少時(shí)使用，×0.9 是為了從測定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時(shí)所消耗的水量。
5 、一般市售鹽酸濃度在12M左右，應(yīng)稀釋至6M使用（具體稀釋倍數(shù)需根據(jù)客戶自備鹽酸的濃度而定，且6M鹽酸易揮發(fā)，應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用）。
6、試劑開封后應(yīng)盡快使用，以免影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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轉(zhuǎn)移核糖核酸（酵母tRNA）Yeast tRNA(Carrier RNA)、胰蛋白酶抑制劑、乙酰膽堿酯酶、葡萄糖氧化酶、黃嘌呤氧化酶、刀豆球蛋白（ConA）、熒光素鉀、組胺、脲酶、加拿大樹膠、X-gal、X-gluc、福林酚、辣根過氧化物酶、Tris、二硫蘇糖醇DTT、蘇木色精、脫氧核糖核酸（鮭魚精）DNA、乙基紫、達(dá)旦黃等各類產(chǎn)品，另有各類實(shí)驗(yàn)室緩沖液、溶液、生化試劑盒，量大價(jià)優(yōu)
關(guān)鍵字： DNS試劑;
伊勢久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行，其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。