沙黃復(fù)染液    

簡(jiǎn)介：    

沙黃，分子式為C20H19ClN4，分子量為350.85，CAS號(hào)為477-73-6，易溶于水成紅色溶液，溶于乙醇成紅色帶黃紅色熒光。對(duì)鹽酸為藍(lán)紅色溶液，過多則呈紫色，大量過多則轉(zhuǎn)為藍(lán)色；對(duì)氫氧化鈉則生成桲紅色沉淀；硫酸則為綠色溶液，稀釋時(shí)先變成藍(lán)色，漸變成紫色，最終變?yōu)榧t色。

革蘭氏染色法革蘭氏染色法，是指細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種重要的鑒別染色法，屬于復(fù)染法。革蘭染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟。未經(jīng)染色的細(xì)菌，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難區(qū)別。經(jīng)染色后，陽(yáng)性菌呈紫色，陰性菌呈紅色，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，從而用以分類鑒定。其染色原理是通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)菌細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，再用95%乙醇進(jìn)行脫色。

BIOISCO 沙黃復(fù)染液主要由沙黃組成，經(jīng)常與結(jié)晶紫、碘液配合使用，適用于檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。該產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可做他用。

組成：

保存條件：

室溫避光保存，一年有效。

自備材料：

1、載玻片、蓋玻片

2、酒精燈

3、光學(xué)顯微鏡

操作步驟(僅供參考)：

1、涂片：取待檢細(xì)菌，于載玻片中央涂成薄層或者或在載玱片上滴加少許無菌水，取菌液與水混合均勻，涂成薄層。

2、干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥。

3、固定：手持載玻片一端，標(biāo)本面朝上，在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動(dòng) 3~5次，每次1 s，溫度不宜過高，防止菌體蛋白變性，放置待涼后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。

4、初染：滴加結(jié)晶紫染色液染色，清水沖洗去染色液。

5、媒染：滴加Gram碘液后，蓋上載玻片，室溫放置并水洗。

6、脫色：滴加脫色液，輕微搖動(dòng)，直至流下的脫色液不再出現(xiàn)紫色時(shí)為止，立即用水沖去脫色液，終止反應(yīng)。

7、復(fù)染：滴加沙黃染色液染色并水洗。

8、加蓋潔凈的蓋玻片，輕壓制成壓片。

注意事項(xiàng)：

1、涂片之前應(yīng)事先在背面做好圓圈標(biāo)記，以便判斷后續(xù)實(shí)驗(yàn)的位置。

2、待檢測(cè)細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間會(huì)影響染色效果，如果陽(yáng)性菌培養(yǎng)過長(zhǎng)或已死亡或細(xì)菌自溶解，都常呈陰性反應(yīng)。

3、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。