"SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜
【培養(yǎng)觀察】
定期觀察SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜生長狀態(tài),注意培養(yǎng)基的pH值變化和細胞密度,及時換液和傳代。
【細胞復(fù)蘇】
復(fù)蘇細胞時,應(yīng)快速將凍存管從液氮中取出并置于37℃水浴中解凍,然后轉(zhuǎn)移到含新鮮培養(yǎng)基的無菌管中并吹打混勻。整個復(fù)蘇過程應(yīng)盡可能在5-10分鐘內(nèi)完成,以確保細胞的高存活率。
【細胞傳代】
傳代時,應(yīng)使用適量的胰蛋白酶溶液進行消化,并在顯微鏡下觀察細胞消化情況。消化下來的細胞容易成團,需要吹打吹散。傳代后,應(yīng)確保細胞均勻分布在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。一般使用凍存液進行凍存,并置于液氮中儲存。
【SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜英文別名】
Skno-1; SKNO1
【細胞培養(yǎng)經(jīng)驗分享】啟蒙老師的重要性:一般進實驗室都有師兄師姐帶著做,他們就是你做細胞的啟蒙老師。他們的操作手法、細節(jié)、理論講解就成了你操作的準則,如營養(yǎng)液、細胞瓶的擺放位置、滅菌處理程序、開蓋手法、細胞吹打手法等等。要學(xué)會他們的正確操作,在第一次的時候就要重視。像養(yǎng)孩子一樣養(yǎng)細胞,細胞有時真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺水、缺二氧化碳、停電、溫度不夠等異常現(xiàn)象,也好及時解決這些意外,避免重復(fù)實驗帶來的更大痛苦。好細胞要及時保種:細胞要分批傳代,這樣即使有一批出了問題,還有一批備用的。像后者一般人可能不容易做到。
不同細胞類型對傳代次數(shù)的敏感性存在差異。原代細胞通常只能在體外維持5-8代,而永生化細胞系可傳代50次以上仍保持穩(wěn)定。但值得注意的是,即使是永生化細胞系,其20代前后的基因表達譜也存在約15%的差異??傊谏镝t(yī)學(xué)研究中堅持使用低代次細胞不僅是技術(shù)規(guī)范,更是科研誠信的體現(xiàn)。研究人員需要建立代次意識,將細胞傳代記錄納入實驗室標準操作流程,并通過定期質(zhì)量檢測確保細胞狀態(tài)的穩(wěn)定性。只有從源頭把控實驗材料的一致性,才能產(chǎn)出經(jīng)得起檢驗的可靠數(shù)據(jù),推動生物醫(yī)學(xué)研究的良性發(fā)展。
【背景信息】
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜詳見相關(guān)文獻介紹
【傳代比例】
1:2-1:4(SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜首次傳代建議1:2)
【來源說明】
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜主要來源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等細胞庫
【生長特性】
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜懸浮生長
【形態(tài)特性】
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜淋巴母細胞樣
【換液周期】
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜每周2-3次
【產(chǎn)品包裝】
復(fù)蘇發(fā)貨:SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存發(fā)貨:1ml凍存管(兩支)
在開始細胞傳代前,必須對細胞狀態(tài)進行仔細檢查。使用倒置顯微鏡觀察細胞,選擇生長狀態(tài)良好、細胞界限清晰、具有立體感的細胞進行傳代。同時要確保細胞無污染、無異常及可疑病變。若發(fā)現(xiàn)細胞狀態(tài)不佳或存在污染跡象,應(yīng)立即終止傳代操作,并對培養(yǎng)環(huán)境進行徹底消毒。
細胞系在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右)是正常的,不要再去延長消化時間,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞:潤洗方法5min還不能消化,以結(jié)腸癌細胞為例,比如:HCT15、LS411和KM12細胞,胰酶消化,一般10 cm培養(yǎng)皿,一次加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。
【物種來源】
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜來源于人源、鼠源等其它物種來源
【培養(yǎng)條件】
37°C、5%CO?、飽和濕度環(huán)境,使用含10%-20%FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
【消化傳代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶促進細胞脫落。(懸浮細胞可省略這步操作)
【污染防控】
嚴格無菌操作,定期檢測支原體污染,必要時使用雙抗預(yù)防細菌污染。
【細胞狀態(tài)】
傳代和消化過程中,應(yīng)密切關(guān)注細胞狀態(tài),避免過度消化或機械損傷導(dǎo)致細胞活性下降。
【污染檢測】
支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性。
【細胞接收流程】
收到細胞后,應(yīng)首先觀察細胞狀態(tài),然后進行75%酒精消毒處理。將細胞置于37℃培養(yǎng)箱中放置2-4小時以穩(wěn)定SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜狀態(tài)。當(dāng)細胞密度達到80%-90%時,即可進行首次傳代培養(yǎng)。
【操作規(guī)范】
在細胞培養(yǎng)和處理過程中,需嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免細胞污染和交叉污染。
【消化條件】
室溫下用胰酶消化1-3分鐘。
【生物安全等級】
1級。
【空泡現(xiàn)象】
在密集培養(yǎng)時,細胞中可見巨大的空泡,這是細胞的正常特性,無需擔(dān)心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清濃度有助于優(yōu)化SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞低代次保種|STR圖譜實驗條件,提高實驗的重復(fù)性和穩(wěn)定性。這一濃度范圍經(jīng)過多年實驗和實踐的驗證,被認為是較為適宜的選擇。
細胞傳代準備工作:預(yù)熱培養(yǎng)基和PBS:在開始傳代前,將完全培養(yǎng)基和磷酸鹽緩沖液(PBS),預(yù)熱至37℃,以確保細胞在操作過程中不會受到溫度沖擊。準備無菌器材:包括無菌吸管、移液槍、離心管、培養(yǎng)皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培養(yǎng)基等。檢查細胞狀態(tài):在顯微鏡下觀察細胞的生長密度和形態(tài),確保細胞處于對數(shù)生長期且狀態(tài)良好。
ATCC細胞庫(American Type Culture Colection),該中心一直致力于細胞分類、鑒定和保藏工作。ATCC是全球最大的生物資源保藏中心,ATCC通過行業(yè)標準產(chǎn)品、服務(wù)和創(chuàng)新解決方案支持全球?qū)W術(shù)、政府、生物技術(shù)、制藥、食品、農(nóng)業(yè)和工業(yè)領(lǐng)域的科學(xué)進步。ATCC提供的服務(wù)和定制解決方案包括細胞和微生物培養(yǎng)、鑒定、生物衍生物的開發(fā)和生產(chǎn)、性能測試和生物資源保藏服務(wù)。美國國家標準協(xié)會(ANSI)認可了ATCC標準開發(fā)組織,并制定了標準協(xié)議,以確保生物材料的可靠性和可重復(fù)性。ATCC的使命是為了獲取、鑒定、保存、開發(fā)、標準化和分發(fā)生物資源和生物信息,以提高和應(yīng)用生物科學(xué)知識。
no-11 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
HIBEpiC Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
NCI-H1975 Cells;背景說明:這株細胞于1988年七月建株。組織提供者是一位非吸煙人士。;傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
B-CPAP Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長 ;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
FRH-0201 Cells;背景說明:膽管癌;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
GM14050 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HAP1 GBA (-) 1 Cells(提供STR鑒定圖譜)
H-3255 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長 ;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
Hs 683 Cells;背景說明:該細胞源自76歲白人男性的左顳葉側(cè)膠質(zhì)瘤組織,有微絨毛,無橋粒。 ;傳代方法:1:4傳代,每周換液2次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:成纖維細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
CMT 64 Cells;背景說明:肺腺癌;雌性;C57;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
SUM 102PT Cells;背景說明:乳腺癌;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
GDM1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:2-3天換液1次。;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 ;相關(guān)產(chǎn)品有:Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
N-Tera-2 Cells;背景說明:畸胎瘤;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
MC/CAR Cells;背景說明:B淋巴;EBV轉(zhuǎn)化;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
SKUT1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:4-1:12傳代,2天換液1次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
HN-SCC-170A Cells(提供STR鑒定圖譜)
IVC4 Cells(提供STR鑒定圖譜)
MCF10A-KRAS-b_type-12 Cells(提供STR鑒定圖譜)
ND14612 Cells(提供STR鑒定圖譜)
PR00036 Cells(提供STR鑒定圖譜)
Ubigene HEK293 RXRA KO Cells(提供STR鑒定圖譜)
WIBRe001-A-31 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HCC374 Cells(提供STR鑒定圖譜)
STTG1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:3—1:6傳代;每周換液2-3次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:星形膠質(zhì)細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞
LC-MS Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:每周換液2次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
FRTL-5 Cells;背景說明:甲狀腺;自發(fā)永生;Fischer;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
B16 BL6 Cells;背景說明:黑色素瘤;雄性;C57BL/6;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
GT39 Cells;背景說明:胃癌;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
GT39 Cells;背景說明:胃癌;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
Colo-201 Cells;背景說明:該細胞源自一位70歲白人男性,CSAp (CSAp-)和CEA陰性。;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮+貼壁;形態(tài)特性:淋巴細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
SW837 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液1-2次;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:上皮細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
BNL-HCC Cells;背景說明:肝;上皮細胞;BALB/c;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
Calu-1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:消化10分鐘。1:2。3-4天長滿;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
Granta519 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
H-1155 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:每周換液2-3次。;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:上皮細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞
T 24 Cells;背景說明:該細胞源自一位81歲白人女性患者的膀胱移行細胞癌組織;來源于移行細胞癌病人的白血病和血漿對T24和相關(guān)細胞株有細胞毒性;倍增時間為19小時;含ras(H-ras)癌基因,表達腫瘤特有抗原。;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
PFSK Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
PA317 Cells小鼠胚胎成纖維細胞|有STR圖譜
EMT6 Cells小鼠乳腺癌細胞|有STR圖譜
BxPC-3 Cells人原位胰腺腺癌細胞|有STR圖譜
WSU-DLCL2 Cells人彌漫大B淋巴瘤細胞|有STR圖譜
L1210-Luc Cells小鼠淋巴細胞白血病細胞|有STR圖譜
HT-29-GFP Cells人結(jié)腸癌細胞|有STR圖譜
RBE Cells人肝膽管癌細胞|有STR圖譜
GCT Cells人巨細胞瘤細胞|有STR圖譜
FTC-133 Cells人濾泡狀甲狀腺癌細胞|有STR圖譜
LTPA Cells小鼠胰腺癌細胞|有STR圖譜
OVCAR-8 Cells人卵巢癌腺癌細胞|有STR圖譜
CBRH-7919 Cells大鼠肝癌細胞|有STR圖譜
NCI-H2347 Cells人肺癌細胞|有STR圖譜
TOV-112D Cells人上皮性卵巢癌細胞|有STR圖譜
IOMM-Lee Cells人腦膜瘤細胞|有STR圖譜
MA-104 Cells猴胚胎腎細胞|有STR圖譜
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CFSC-8B Cells大鼠肝星形細胞|有STR圖譜
WSU-HN6 Cells人舌鱗癌細胞|有STR圖譜
HaCaT Cells人角質(zhì)細胞|有STR圖譜
Hs 766T Cells人胰腺癌細胞|有STR圖譜
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HEK293-EBNA Cells人胚腎細胞|有STR圖譜
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