"Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜
【培養(yǎng)觀察】
定期觀察Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜生長狀態(tài),注意培養(yǎng)基的pH值變化和細胞密度,及時換液和傳代。
【細胞復(fù)蘇】
復(fù)蘇細胞時,應(yīng)快速將凍存管從液氮中取出并置于37℃水浴中解凍,然后轉(zhuǎn)移到含新鮮培養(yǎng)基的無菌管中并吹打混勻。整個復(fù)蘇過程應(yīng)盡可能在5-10分鐘內(nèi)完成,以確保細胞的高存活率。
【細胞傳代】
傳代時,應(yīng)使用適量的胰蛋白酶溶液進行消化,并在顯微鏡下觀察細胞消化情況。消化下來的細胞容易成團,需要吹打吹散。傳代后,應(yīng)確保細胞均勻分布在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。一般使用凍存液進行凍存,并置于液氮中儲存。
【Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜英文別名】
PFEIFFER
【細胞培養(yǎng)經(jīng)驗分享】啟蒙老師的重要性:一般進實驗室都有師兄師姐帶著做,他們就是你做細胞的啟蒙老師。他們的操作手法、細節(jié)、理論講解就成了你操作的準則,如營養(yǎng)液、細胞瓶的擺放位置、滅菌處理程序、開蓋手法、細胞吹打手法等等。要學(xué)會他們的正確操作,在第一次的時候就要重視。像養(yǎng)孩子一樣養(yǎng)細胞,細胞有時真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺水、缺二氧化碳、停電、溫度不夠等異常現(xiàn)象,也好及時解決這些意外,避免重復(fù)實驗帶來的更大痛苦。好細胞要及時保種:細胞要分批傳代,這樣即使有一批出了問題,還有一批備用的。像后者一般人可能不容易做到。
細胞培養(yǎng)瓶破裂或滲漏是實驗室最緊急的情況之一。當發(fā)現(xiàn)容器破損時,應(yīng)立即執(zhí)行三級處理流程:首先將破損培養(yǎng)瓶放入生物安全柜,用消毒劑浸泡的紗布覆蓋裂口;隨后將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至備用培養(yǎng)瓶,轉(zhuǎn)移過程需嚴格保證無菌操作;最后對工作臺面進行徹底消毒。值得注意的是,聚乙烯材質(zhì)的培養(yǎng)瓶在反復(fù)凍融后更易產(chǎn)生微裂紋,建議使用前進行透光檢查。對于珍貴細胞系,可預(yù)先分裝凍存?zhèn)浞?,并建立定期鏡檢制度,每周至少兩次檢查培養(yǎng)容器完整性。
【背景信息】
Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜詳見相關(guān)文獻介紹
【傳代比例】
1:2-1:4(Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜首次傳代建議1:2)
【來源說明】
Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜主要來源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等細胞庫
【生長特性】
Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜懸浮生長
【形態(tài)特性】
Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜淋巴母細胞樣
【換液周期】
Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜每周2-3次
【產(chǎn)品包裝】
復(fù)蘇發(fā)貨:Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存發(fā)貨:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代是細胞培養(yǎng)中的一項基本操作技術(shù),其目的是使細胞持續(xù)保持良好的生長狀態(tài),同時擴大細胞培養(yǎng)規(guī)模。細胞傳代操作看似簡單,但其中涉及諸多細節(jié)和注意事項,需要實驗人員嚴格遵循操作規(guī)程,才能確保細胞培養(yǎng)的成功。
細胞系在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右)是正常的,不要再去延長消化時間,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞:潤洗方法5min還不能消化,以結(jié)腸癌細胞為例,比如:HCT15、LS411和KM12細胞,胰酶消化,一般10 cm培養(yǎng)皿,一次加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。
【物種來源】
Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜來源于人源、鼠源等其它物種來源
【培養(yǎng)條件】
37°C、5%CO?、飽和濕度環(huán)境,使用含10%-20%FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
【消化傳代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶促進細胞脫落。(懸浮細胞可省略這步操作)
【污染防控】
嚴格無菌操作,定期檢測支原體污染,必要時使用雙抗預(yù)防細菌污染。
【細胞狀態(tài)】
傳代和消化過程中,應(yīng)密切關(guān)注細胞狀態(tài),避免過度消化或機械損傷導(dǎo)致細胞活性下降。
【污染檢測】
支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性。
【細胞接收流程】
收到細胞后,應(yīng)首先觀察細胞狀態(tài),然后進行75%酒精消毒處理。將細胞置于37℃培養(yǎng)箱中放置2-4小時以穩(wěn)定Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜狀態(tài)。當細胞密度達到80%-90%時,即可進行首次傳代培養(yǎng)。
【操作規(guī)范】
在細胞培養(yǎng)和處理過程中,需嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免細胞污染和交叉污染。
【消化條件】
室溫下用胰酶消化1-3分鐘。
【生物安全等級】
1級。
【空泡現(xiàn)象】
在密集培養(yǎng)時,細胞中可見巨大的空泡,這是細胞的正常特性,無需擔(dān)心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清濃度有助于優(yōu)化Pfeiffer Cells人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞低代次保種|STR圖譜實驗條件,提高實驗的重復(fù)性和穩(wěn)定性。這一濃度范圍經(jīng)過多年實驗和實踐的驗證,被認為是較為適宜的選擇。
CO?細胞培養(yǎng)箱作為細胞培養(yǎng)的核心設(shè)備,通過精確控制溫度(通常37℃)、濕度(95%左右)和CO?濃度(5%),模擬體內(nèi)生理環(huán)境?,F(xiàn)代培養(yǎng)箱采用HEPA過濾系統(tǒng)實現(xiàn)空氣凈化,部分型號配備紫外燈或銅質(zhì)內(nèi)膽增強抑菌能力。值得注意的是,有些新型智能CO?培養(yǎng)箱已實現(xiàn)遠程監(jiān)控,通過傳感器實時反饋箱內(nèi)O?含量和pH值變化,大幅降低污染風(fēng)險。使用時需定期校準氣體濃度傳感器,并避免頻繁開門導(dǎo)致環(huán)境波動。
細胞凍存密度為1×10^6 cells/mL,復(fù)蘇后活率可達85%以上,而密度降至5×10^5 cells/mL時活率可能下降20%-30%。維持1×10^6 cells/mL以上的凍存密度是保障細胞復(fù)蘇率的基石,但需結(jié)合細胞類型、凍存工藝和終端用途進行系統(tǒng)優(yōu)化。這一標準的建立不僅提升了基礎(chǔ)研究可靠性,更為再生醫(yī)學(xué)和精準醫(yī)療提供了關(guān)鍵技術(shù)支撐。隨著新型凍存技術(shù)的發(fā)展,密度與存活率的關(guān)聯(lián)機制將進一步被揭示,推動細胞保存技術(shù)邁向更高水平。
KYSE-510 Cells;背景說明:食管鱗癌;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
JHH7 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
COV-434 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
Clone M-3 Cells;背景說明:黑色素瘤;雄性;DBA;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
HPASMC Cells;背景說明:肺動脈平滑肌 Cells;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
HAP1 APOBEC3A (-) 4 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HAP1 SLC27A1 (-) 1 Cells(提供STR鑒定圖譜)
NCI-H1650 Cells;背景說明:該細胞是從一名27歲白人男性(10年煙齡)支氣管肺泡癌患者的胸腔積液中分離得到的。;傳代方法:1:4-1:6傳代;2-3天換液1次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
SLK Cells;背景說明:肉瘤;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
LC-1 sq Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞
H2452 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
BAC1.2F5 Cells;背景說明:巨噬細胞;SV40轉(zhuǎn)化;BALB/c x A.CA;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞
LUDLU1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
MG-HU-3 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
Panc203 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
IAR 27 Cells(提供STR鑒定圖譜)
LG1 Cells(提供STR鑒定圖譜)
NBE-4 Cells(提供STR鑒定圖譜)
PACS1003i-GM27161 Cells(提供STR鑒定圖譜)
S004934 Cells(提供STR鑒定圖譜)
Ubigene HeLa PKN3 KO Cells(提供STR鑒定圖譜)
XP21PV Cells(提供STR鑒定圖譜)
HG02381 Cells(提供STR鑒定圖譜)
H-650 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:3-1:6傳代;;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:球形的;相關(guān)產(chǎn)品有:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
P3J HR-1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:每2-3天換液;生長特性:懸浮生長 ;形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
SK-MEL-MeWo Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:3-1:5傳代,2-3天換液1次。;生長特性:混合生長;形態(tài)特性:成纖維細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
OVCA420 Cells;背景說明:卵巢癌;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
SiHa Cells;背景說明:該細胞來源于一位日本病人的手術(shù)切除的腫瘤組織。電鏡下可以看到細胞間典型的橋粒和細胞質(zhì)中大量的張力絲。1975年發(fā)現(xiàn)有支原體污染,而后被去除。該細胞整合有HPV16基因組,每個細胞中有1~2個拷貝。;傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
SiHa Cells;背景說明:該細胞來源于一位日本病人的手術(shù)切除的腫瘤組織。電鏡下可以看到細胞間典型的橋粒和細胞質(zhì)中大量的張力絲。1975年發(fā)現(xiàn)有支原體污染,而后被去除。該細胞整合有HPV16基因組,每個細胞中有1~2個拷貝。;傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
Dx5 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:8傳代;每周2-3次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:成纖維細胞樣 ;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
H2106 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:每周換液2次。;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
SKBR-3 Cells;背景說明:這株細胞源自胸水。沒有病毒顆粒。亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒,肝糖原顆粒,大溶酶體,成束的細胞質(zhì)纖絲。SK-BR-3細胞株過表達HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。;傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
M-G63 Cells;背景說明:該細胞源自14歲患有骨肉瘤的白人男性;聚次黃嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸、和D可以誘導(dǎo)產(chǎn)生高水平的干擾素。該細胞表達TGF-β受體Ⅰ和Ⅱ。 ;傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:成纖維細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
SHI-1 Cells;背景說明:急性單核細胞白血?。荒行?傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
SHEP1 Cells;背景說明:神經(jīng)母細胞瘤;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
NT-2 Cells;背景說明:畸胎瘤;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
PL-9 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
RM-1 [Mouse prostate carcinoma] Cells小鼠前列腺癌細胞|有STR圖譜
A549/DDP Cells人肺腺癌細胞|有STR圖譜
WSU-DLCL2-Luc Cells人彌漫大B淋巴瘤細胞|有STR圖譜
MB49-Luc Cells小鼠膀胱癌細胞|有STR圖譜
BALL-1 Cells人B淋巴細胞急性白血病細胞|有STR圖譜
JIMT-1 Cells人乳腺癌細胞|有STR圖譜
SCC-25 Cells人舌鱗癌細胞|有STR圖譜
C8166 Cells人T淋巴細胞白血病細胞|有STR圖譜
OVCAR-3 Cells人卵巢癌細胞|有STR圖譜
MDA-MB-231-GFP Cells人乳腺癌細胞|有STR圖譜
MC-38-GFP Cells小鼠結(jié)腸癌細胞|有STR圖譜
SW1710 Cells人膀胱癌細胞|有STR圖譜
CoC1 Cells人卵巢癌細胞|有STR圖譜
LEC-1 Cells倉鼠卵巢細胞|有STR圖譜
A549+RFP Cells人肺癌細胞|有STR圖譜
T/G HA-VSMC Cells人主動脈血管平滑肌細胞|有STR圖譜
KLE Cells人子宮內(nèi)膜癌細胞|有STR圖譜
Malme-3M Cells人皮膚惡性黑色素瘤細胞|有STR圖譜
CW-2 Cells人結(jié)腸腺癌細胞|有STR圖譜
MM.1S-Luc Cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞|有STR圖譜
COLO 205 Cells人結(jié)腸癌細胞|有STR圖譜
U-2932 Cells人B細胞淋巴瘤細胞|有STR圖譜
HIEC-6 Cells人腸上皮細胞|有STR圖譜
CAL-62 Cells人甲狀腺癌細胞|有STR圖譜
NCI-H2452 Cells人間皮瘤細胞|有STR圖譜
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Jurkat, Clone E6-1-Luc Cells人急性T淋巴細胞白血病細胞|有STR圖譜
Caki-2-Luc Cells人腎透明細胞癌細胞|有STR圖譜
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C6-RFP Cells大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞|有STR圖譜
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公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等細胞系