"IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜
【培養(yǎng)觀察】
定期觀察IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜生長(zhǎng)狀態(tài),注意培養(yǎng)基的pH值變化和細(xì)胞密度,及時(shí)換液和傳代。
【細(xì)胞復(fù)蘇】
復(fù)蘇細(xì)胞時(shí),應(yīng)快速將凍存管從液氮中取出并置于37℃水浴中解凍,然后轉(zhuǎn)移到含新鮮培養(yǎng)基的無菌管中并吹打混勻。整個(gè)復(fù)蘇過程應(yīng)盡可能在5-10分鐘內(nèi)完成,以確保細(xì)胞的高存活率。
【細(xì)胞傳代】
傳代時(shí),應(yīng)使用適量的胰蛋白酶溶液進(jìn)行消化,并在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況。消化下來的細(xì)胞容易成團(tuán),需要吹打吹散。傳代后,應(yīng)確保細(xì)胞均勻分布在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。一般使用凍存液進(jìn)行凍存,并置于液氮中儲(chǔ)存。
【IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜英文別名】
IHH4
烘箱(干燥箱)的干熱滅菌功能對(duì)玻璃器皿至關(guān)重要。鼓風(fēng)式設(shè)計(jì)確保160℃高溫下熱量均勻分布,但操作中存在三個(gè)技術(shù)要點(diǎn):一是必須同步啟動(dòng)鼓風(fēng)與加熱功能,避免局部過熱;二是100℃以下才能開啟箱門,防止玻璃器皿因驟冷破裂;三是需使用耐高溫牛皮紙包裹器械,普通棉質(zhì)材料在高溫下碳化產(chǎn)生的微??赡苡绊懠?xì)胞貼壁。有新研發(fā)的真空烘箱將滅菌時(shí)間縮短30%,同時(shí)降低能源消耗。
細(xì)胞代謝隨溫度降低而逐漸減慢。當(dāng)溫度降至冰點(diǎn)以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的游離水會(huì)形成冰晶,導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)胞器結(jié)構(gòu)的機(jī)械損傷,最終引發(fā)細(xì)胞死亡。然而,通過添加冷凍保護(hù)劑(如二甲亞砜或甘油),可以顯著提高細(xì)胞在深低溫環(huán)境下的存活率。這些保護(hù)劑能夠降低冰晶的形成概率,并減少低溫對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞。
【背景信息】
IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
【傳代比例】
1:2-1:4(IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜首次傳代建議1:2)
【來源說明】
IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜主要來源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等細(xì)胞庫(kù)
【生長(zhǎng)特性】
IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜貼壁生長(zhǎng)
【形態(tài)特性】
IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜上皮細(xì)胞樣
【換液周期】
IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜每周2-3次
【產(chǎn)品包裝】
復(fù)蘇發(fā)貨:IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存發(fā)貨:1ml凍存管(兩支)
在生命科學(xué)研究的微觀世界里,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)猶如搭建了一座精密運(yùn)轉(zhuǎn)的舞臺(tái),而細(xì)胞消化過程則是這臺(tái)大戲中至關(guān)重要的場(chǎng)景轉(zhuǎn)換環(huán)節(jié)。當(dāng)科研人員需要為細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)、開展單細(xì)胞分離或執(zhí)行精確計(jì)數(shù)時(shí),胰蛋白酶便化身成為舞臺(tái)幕后的魔法師,用其精妙的生物化學(xué)機(jī)制完成這場(chǎng)細(xì)胞集體的""溫柔離散""。
細(xì)胞系在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右)是正常的,不要再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞:潤(rùn)洗方法5min還不能消化,以結(jié)腸癌細(xì)胞為例,比如:HCT15、LS411和KM12細(xì)胞,胰酶消化,一般10 cm培養(yǎng)皿,一次加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。
【物種來源】
IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜來源于人源、鼠源等其它物種來源
【培養(yǎng)條件】
37°C、5%CO?、飽和濕度環(huán)境,使用含10%-20%FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
【消化傳代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶促進(jìn)細(xì)胞脫落。(懸浮細(xì)胞可省略這步操作)
【污染防控】
嚴(yán)格無菌操作,定期檢測(cè)支原體污染,必要時(shí)使用雙抗預(yù)防細(xì)菌污染。
【細(xì)胞狀態(tài)】
傳代和消化過程中,應(yīng)密切關(guān)注細(xì)胞狀態(tài),避免過度消化或機(jī)械損傷導(dǎo)致細(xì)胞活性下降。
【污染檢測(cè)】
支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性。
【細(xì)胞接收流程】
收到細(xì)胞后,應(yīng)首先觀察細(xì)胞狀態(tài),然后進(jìn)行75%酒精消毒處理。將細(xì)胞置于37℃培養(yǎng)箱中放置2-4小時(shí)以穩(wěn)定IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜狀態(tài)。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),即可進(jìn)行首次傳代培養(yǎng)。
【操作規(guī)范】
在細(xì)胞培養(yǎng)和處理過程中,需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免細(xì)胞污染和交叉污染。
【消化條件】
室溫下用胰酶消化1-3分鐘。
【生物安全等級(jí)】
1級(jí)。
【空泡現(xiàn)象】
在密集培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞中可見巨大的空泡,這是細(xì)胞的正常特性,無需擔(dān)心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清濃度有助于優(yōu)化IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞低代次保種|STR圖譜實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性。這一濃度范圍經(jīng)過多年實(shí)驗(yàn)和實(shí)踐的驗(yàn)證,被認(rèn)為是較為適宜的選擇。
細(xì)胞消化步驟(一):吸棄舊培養(yǎng)基:輕輕傾斜培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶,用吸管吸棄舊的培養(yǎng)基,注意不要吸走細(xì)胞。洗滌細(xì)胞:向培養(yǎng)皿中加入適量的PBS,輕輕搖晃以洗滌細(xì)胞表面,然后吸棄PBS。這一步是為了去除殘留的培養(yǎng)基和代謝產(chǎn)物,以及可能干擾消化的物質(zhì)。加入胰蛋白酶:根據(jù)培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的大小和細(xì)胞的密度,向其中加入適量的胰蛋白酶溶液。確保胰蛋白酶均勻要蓋細(xì)胞表面。
直接倒掉上清液能夠提高操作效率,節(jié)省時(shí)間。但這種方式存在一定風(fēng)險(xiǎn),直接傾倒時(shí)較難控制力度和角度,如果操作不慎,容易使細(xì)胞沉淀隨著上清液一起流出,導(dǎo)致細(xì)胞損失,而且可能會(huì)因液體快速流下沖擊細(xì)胞沉淀造成細(xì)胞的物理性損傷。在實(shí)際的細(xì)胞傳代操作中,應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的特性、實(shí)驗(yàn)的要求以及個(gè)人的操作熟練程度來選擇合適的上清液處理方式。對(duì)于新手或者處理珍貴細(xì)胞系時(shí),建議優(yōu)先采用移液槍吸走的方式,以保障細(xì)胞的活性和傳代的成功率。而在積累了豐富經(jīng)驗(yàn)且對(duì)實(shí)驗(yàn)條件有充分把握的情況下,可以根據(jù)具體情況靈活運(yùn)用直接倒掉上清液的方法,在保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的同時(shí)提高工作效率。
NTERA-2 cl.D1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
SK-MES-1 Cells;背景說明:源于一位65歲患有肺鱗狀細(xì)胞癌的白人男性,自轉(zhuǎn)移性胸腔積液分離而來。;傳代方法:1:2傳代;生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng);形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:NEC細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞、Simpson細(xì)胞
LS 180 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HT-1080細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞、H-661細(xì)胞
RPMC Cells;背景說明:腹膜間皮 Cells;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
HIT clone T15 Cells;背景說明:胰島β細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
GM13439 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HAP1 FLVCR1 (-) 1 Cells(提供STR鑒定圖譜)
OCI-LY-19 Cells;背景說明:彌漫大B淋巴瘤;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞
Me-Wo Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:3-1:5傳代,2-3天換液1次。;生長(zhǎng)特性:混合生長(zhǎng);形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
H-23 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。;生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng);形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
BEL 7402 Cells;背景說明:BEL-7402細(xì)胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。;傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長(zhǎng)滿;生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng);形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
RTMC Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
NCIH820 Cells;背景說明:乳頭狀肺腺癌;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HBE細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞
JEG3 Cells;背景說明:這是一株超三倍體人類細(xì)胞株;傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長(zhǎng)滿;生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng);形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
FL-83B Cells;背景說明:肝;自發(fā)永生;C57BL/6J;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞
HM-1 ES Cells(提供STR鑒定圖譜)
irs2 Cells(提供STR鑒定圖譜)
MCF-7/164R-5 Cells(提供STR鑒定圖譜)
ND13006 Cells(提供STR鑒定圖譜)
PPL/LULS49 Cells(提供STR鑒定圖譜)
Ubigene 4T1 Ccar1 KO Cells(提供STR鑒定圖譜)
UN7RGB Cells(提供STR鑒定圖譜)
HE47 Cells(提供STR鑒定圖譜)
WERI Rb-1 Cells;背景說明:WERI-Rb-I細(xì)胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的兩株人眼癌細(xì)胞系中的一株。 細(xì)胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 掃描電鏡顯示在表面囊泡,板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。 細(xì)胞分化研究,腫瘤治療的動(dòng)物模型和生化評(píng)價(jià)都涉及這株細(xì)胞。;傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。;生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng);形態(tài)特性:圓形細(xì)胞聚集成葡萄狀;相關(guān)產(chǎn)品有:LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞
X63Ag8.653 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
OCI AML3 Cells;背景說明:急性髓系白血??;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SW 839細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、OVISE細(xì)胞
C3H10T1/2 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
IGROV1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
IGROV1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
MCM Cells;背景說明:心肌;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
74Int Cells;背景說明:小腸;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RT-BM細(xì)胞、H-1581細(xì)胞、H6c7細(xì)胞
CHP-126 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞
NB1-RGB Cells;背景說明:皮膚;成纖維細(xì)胞;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:D10.G4.1細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞
IBRS-2 Cells;背景說明:腎;自發(fā)永生;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞
IM9 Cells;背景說明:B淋巴細(xì)胞;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
KYSE-520 Cells;背景說明:食管鱗癌;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長(zhǎng)特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
P31/Fujioka Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:5傳代;生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng);形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
PaTu 8988t Cells人胰腺癌細(xì)胞|有STR圖譜
SCC-9 Cells人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞|有STR圖譜
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4T1-GFP Cells小鼠乳腺癌細(xì)胞|有STR圖譜
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MDA-MB-231-GFP Cells人乳腺癌細(xì)胞|有STR圖譜
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CBRH7919 Cells大鼠肝癌細(xì)胞|有STR圖譜
OCI-Ly10 Cells人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞|有STR圖譜
NFS-60 Cells小鼠髓性白血病淋巴細(xì)胞|有STR圖譜
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Toledo Cells人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞|有STR圖譜
ExpiCHO Cells中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞|有STR圖譜
SW-10 Cells小鼠神經(jīng)元細(xì)胞|有STR圖譜
GL261-GFP Cells小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞|有STR圖譜
OS-RC-2 Cells人腎癌細(xì)胞|有STR圖譜
U-87MG ATCC Cells人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞|有STR圖譜
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關(guān)鍵字: IHH-4 Cells人甲狀腺乳頭狀癌細(xì);復(fù)蘇細(xì)胞系;細(xì)胞STR鑒定報(bào)告;細(xì)胞STR鑒定圖譜;ATCC|DSMZ細(xì)胞庫(kù);
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等細(xì)胞系