方法和結果:四種新的二烯烷型二萜,3-O-(2,3-二甲基丁酰基)-13-O-十二烷酰-20-O-乙酰烯醇 (1),3-O-(2,3-二甲基丁酰基)-13-O-十二烷酰-20-脫氧丁烯醇 (2),3-O-(2E,4Z-癸二烯酰)-20-脫氧烯醇 (3),和 3-O-(2E,4E-癸二烯酰)-20-脫氧烯醇 (4),兩種新的麻風樹型二萜,甘孢素 D (9) 和 E (10),以及四種已知的烯烷型二萜.通過光譜和化學分析闡明它們的結構,并與二萜一起培養(yǎng)胚芽期的單個非洲爪蟾細胞以測試生物活性。結論:20-脫氧烯醇二萜 3 和 4 誘導的細胞切割停滯最大 (每種化合物 0.5 μ g/ml 導致 >75% 的切割停滯),但當 C-16 具有?;鶜埢鶗r,細胞切割抑制活性變弱。相比之下,麻黃藤二萜 kansuinin D (9) 沒有活性。
在本研究中,研究了絲狀真菌 Mortierella ramanniana 和 Gibberella fujikuroi 對兩種雙氧二萜類化合物 20-Deoxyingenol (1) 和 13-oxyingenol dodecanoat (2) 的區(qū)域選擇性和立體選擇性羥基化反應。方法和結果:分離了底物 1 的 4 種未描述的代謝物 (3-6) 和底物 2 的 2 種未描述的代謝物 (7 和 8)。通過廣泛的 NMR 和 HR-ESI-MS 數據分析,所有代謝物均被鑒定為羥基化二烷衍生物。評估所有生物轉化化合物和底物對三種人癌細胞系的細胞毒性,包括人結腸癌 Caco-2 、乳腺癌 MCF-7 和阿霉素 (ADM) 耐藥 MCF-7/ADM 細胞系。所有 ingenane 醇 (1 和 3-6) 均未顯示出顯著的細胞毒活性。底物 13-oxyingenol dodecanoat (2) 表現(xiàn)出中等細胞毒性,IC50 值為 35.59 ± 5.37 μmol·L-1(Caco-2)、24.04 ± 4.70 μmol·L-1 (MCF-7) 和 22.24 ± 5.19 μmol·L-1 (MCF-7/ADM)。然而,代謝物 7 和 8 沒有顯示出顯著的細胞毒性。結論:這些結果表明,底物 2 的 C-13 脂肪酸酯的羥基化可顯著降低細胞毒活性。
CAS 54706-99-9對應的化合物為20-去氧巨大戟萜醇(20-Deoxyingenol),以下是對其詳細介紹:
CAS號:54706-99-9
英文名稱:20-Deoxyingenol
分子式:C??H??O?
分子量:332.43
外觀:白色至類白色粉末
純度:通?!?8%(HPLC檢測)
熔點:208~209℃(分解)
沸點:470.5±45.0℃(預測值)
密度:1.26±0.1 g/cm3(20℃,760 Torr)
溶解性:可溶于DMSO等有機溶劑,微溶于水(<0.1 mg/mL)
儲存條件:-20℃冷藏,避光、密封、干燥保存
植物來源:主要從大戟科植物甘遂(Euphorbia kansui)的根中分離提取得到。
促進自噬和溶酶體生物發(fā)生:通過促進體外轉錄因子EB(TFEB)的核易位來實現(xiàn)。
保護軟骨細胞:在體外研究中,20-去氧巨大戟萜醇(2.5~10 mM;24 h)可保護軟骨細胞免受叔丁基過氧化氫(TBHP;100 μM)誘導的細胞死亡,并降低凋亡蛋白cleaved-caspase3和衰老蛋白p16INK4a的表達水平。在濃度低于10 mM時,對軟骨細胞無細胞毒性作用。
恢復自噬流:在TBHP處理的軟骨細胞中,10 mM的20-去氧巨大戟萜醇可恢復自噬流。
促進TFEB核水平:在TBHP處理的軟骨細胞中,4~10 mM的20-去氧巨大戟萜醇可促進TFEB的核水平。
體內抗骨關節(jié)炎作用:在小鼠內側半月板不穩(wěn)定(DMM)模型中,20 mg/kg/d的20-去氧巨大戟萜醇(腹腔注射,連續(xù)8周)可減輕骨關節(jié)炎的進展,表現(xiàn)為關節(jié)間隙稍寬、骨密度和鈣化減少、透明軟骨厚度減少得到抑制、關節(jié)組織中軟骨細胞紊亂和肥大得到緩解、關節(jié)軟骨表面侵蝕減少、蛋白聚糖含量增加、LAMP1和LC3 II陽性染色點增多、cleaved-caspase3和P16INK4a減少以及TFEB核水平增加。
科研領域:作為標準品或對照品,用于生物檢定、抗生素或生化藥品中效價、毒性或含量的測定,以及藥理實驗和含量測定。
醫(yī)藥開發(fā):基于其促進自噬和溶酶體生物發(fā)生以及抗骨關節(jié)炎等生物活性,20-去氧巨大戟萜醇在新型藥物研發(fā)中具有潛在應用價值。
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