土壤堿性磷酸酶(soil alkaline phosphatase,S-AKP/ALP)活性測定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉(zhuǎn) 化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效 磷含量和 pH 顯著影響。通常按照其最適 pH 范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。
測定原理:
堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP 催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計算 出 S-AKP/ALP 活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、冰、 蒸餾水、無水乙醇和甲苯。
催化反應(yīng):
稱取風干混勻土壤約 0.1g,加入 50μl 甲苯(自備),輕搖 15min;加 400μl 試劑一并且搖勻后,置于 37℃恒溫培養(yǎng)箱,開始計時,催化反應(yīng) 24h;到時后迅速加入 1ml 試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應(yīng)。 8000g,25℃離心 10min,取上清液置于冰上待測。
顯色反應(yīng):
1. 分光光度計預熱 30 min,調(diào)節(jié)波長到 660 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取 1ml 玻璃比色皿,加入 50 μl 蒸餾水,100 μl 試劑三,20 μl 試劑四,充分混勻,顯色后 再加蒸餾水 830 μl,混勻后 25℃靜置 30 min,于 660 nm 測定吸光度,記為 A 空白管。
3. 標準管:取 1ml 玻璃比色皿,加入 50 μl 標準液,100 μl 試劑三,20 μl 試劑四,充分混勻,顯色后 再加蒸餾水 830 μl,混勻后 25℃靜置 30 min,于 660 nm 測定吸光度,記為 A 標準管。
4. 測定管:取 1ml 玻璃比色皿,加入 50 μl 上清液,100 μl 試劑三,20 μl 試劑四,充分混勻,顯色后 再加蒸餾水 830 μl,混勻后 25℃靜置 30 min,于 660 nm 測定吸光度,記為 A 測定管。
注意事項:
空白管和標準管只需測定一次。
溫馨提示:產(chǎn)品詳情請咨詢客服。
關(guān)鍵字: 土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)檢;
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