木質(zhì)素過氧化物酶(Lip)檢測試劑盒
微量法 100T/96S
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
木質(zhì)素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系,在木質(zhì) 素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應用潛力。
測定原理:
木質(zhì)素過氧化物酶催化天青脫甲基,在 651nm 處測定吸光值減少。
需自備儀器和用品:
天平、研缽、低溫離心機、酶標儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、冰。
酶液提取:
1、組織:按照質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1ml 試劑一) 加入試劑一,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。
2、細胞:按照細胞數(shù)量(104 個):試劑一體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1ml 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。
3、培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。
測定步驟:
1、分光光度計預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 651nm,蒸餾水調(diào)零。
2、臨用前按每個樣本試劑一:試劑二:試劑三=80:40:40(μl)的比例配制工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用。
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