牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專門開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
4. PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn)，不能用于定量。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研
低溫運(yùn)輸、-20℃保存，有效期一年。
DNA 模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見使用方法）。
牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒使用方法
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
8. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 上步制備的 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的第 4號(hào)（濃度為 1×10E4 拷貝/μL，10μL 相當(dāng)于 1 萬(wàn)拷貝）或第 5 號(hào)（濃度為 1×10E5拷貝/μL，10μL 相當(dāng)于 10 萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC。另外用水作為 NC。如果每次制備需要 200μL 樣品，則 PC 和 NC 的體積也必須是 200μL用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次一管式病毒 DNAout
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20 μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照，6 個(gè)用于 PCR 陽(yáng)性對(duì)照。如果做 2-3 次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加 2 或 3 倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加）：
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對(duì)照，其他熒光 PCR 儀
器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene
3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，則用水替代
牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒蓋上蓋子后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化）。
過程 溫度 時(shí)間
13. 數(shù)據(jù)采集
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合 DNA 時(shí)，吸收光譜在 471 nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500 nm，發(fā)射光譜在 530 nm。信號(hào)采集可以設(shè)置在復(fù)性或延伸步驟。
四、數(shù)據(jù)處理
14. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè)，則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值，再推算出其濃度。
15. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè)，只判斷陽(yáng)性或陰性，則陰性對(duì)照 Ct 必須大于或等于 40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線，Ct 值應(yīng)該小于或等于30。對(duì)待測(cè)樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小于或等于 35 則為陽(yáng)性。如果在 35-40 之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性，如果小于 40，則為陽(yáng)性。
牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒關(guān)聯(lián)產(chǎn)品
| Zaocys dhumnades烏梢蛇PCR試劑盒 | 13-90812 | 50次 |
| Tritrichomonas foetus胎兒三毛滴蟲PCR試劑盒 | 13-92200 | 50次 |
| Bulbus fritillariae cirrhosae川貝母PCR鑒定試劑盒 | 13-99047 | 50次 |
| Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒cccDNA 染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-10000 | 50次 |
| 鹿源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-112 | 50次 |
| Bovine Papillomavirus(BoPV)牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-11200 | 50次 |
| Chlamydia spp.衣原體通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-11300 | 50次 |
| 馬源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-116 | 50次 |
| Leptospira spp.鉤端螺旋體染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-12700 | 50次 |
| 小鼠線粒體DNA染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-141 | 50次 |
| Chikungunya Virus(CHIKV)基孔肯尼雅病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-15100 | 50次 |
| Bursaphelenchus xylophilus松材線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-1540 | 50次 |
| Influenza Virus A甲型流感（禽流感）病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-15900 | 50次 |
| Influenza Virus A甲型流感（禽流感）病毒H1N1亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-15911 | 50次 |
| Influenza Virus A甲型流感（禽流感）病毒H2N2亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-15922 | 50次 |
| Influenza Virus A甲型流感（禽流感）病毒H9N2亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-15992 | 50次 |
| Home sapiens-Derived Material人源性成分DNA染料法熒光定量PCR試劑盒(不含內(nèi)參) | 14-168同14-190701 | 50次 |
| Rabies Virus狂犬病病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-18000 | 50次 |
| Leishmania spp.利什曼原蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-18600 | 50次 |
| Pseudomonas spp.假單胞菌屬染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-20200 | 50次 |
| Equine Herpesvirus 2 (EHV-2)馬皰疹病毒2型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-20820 | 50次 |
| Ovine pulmonary adenocarcinoma virus(OPAV)綿羊肺腺瘤病病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-22001同14-22000 | 50次 |
| Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1)人免疫缺陷病毒I型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-22900 | 50次 |
| Bovine Parainfluenza Virus 3(BPIV-3)牛副流感病毒3型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-23600 | 50次 |
| Bovine Adenovirus(BAV)牛腺病毒（4-8型）染料法熒光定量PCR 試劑盒 | 14-23700 | 50次 |
| Marteilia refringens折光馬爾太蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-24310 | 50次 |
| Bacillus anthracis炭疽芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-25410 | 50次 |
| Bacillus subtilis枯草芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-25450 | 50次 |
| Human Papillomavirus (HPV)人乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-30400 | 50次 |
| Cronobacter spp.克羅諾桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-30800 | 50次 |
| Bartonella spp.巴爾通體染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-31300 | 50次 |
| Pseudorabies Virus(PrV)偽狂犬病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-35101同14-35100 | 50次 |
| Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒B型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-37020 | 50次 |
| Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒C型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-37030 | 50次 |
| Chuzan Virus中山病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-37300 | 50次 |
| Diarrheagenic Escherichia coli致瀉性大腸桿菌（致瀉性大腸埃希氏菌）染料法熒光定量PCR試劑盒（停） | 14-39500 | 50次 |
| E.coli大腸桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒(含致病性和非致病性) | 14-39800 | 50次 |
| Shigella spp.志賀氏菌屬染料法熒光定量PCR試劑盒 | 14-40000 | 50次 |
| Bovine Reovirus牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 14-41100 | 50次 |
關(guān)鍵字： 牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒;Bovine Papillomaviru;牛乳頭瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒;PCR檢測(cè)試劑盒;雅吉生物;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
本公司鄭重承諾：質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。