一、基本性質(zhì)

• 化學(xué)名稱：DL - 二硫蘇糖醇（DL-Dithiothreitol）

• CAS 號(hào)：3483-12-3

• 分子式：C?H??O?S?

• 分子量：154.25 g/mol

• 物理性質(zhì)：白色結(jié)晶性粉末，易溶于水、乙醇、丙酮，不溶于乙醚；熔點(diǎn)約 42-43℃，穩(wěn)定性較好，但易被氧化，需避光、密封保存。

二、主要作用與用途

1. 還原二硫鍵
   能特異性還原蛋白質(zhì)、多肽等分子中的二硫鍵（-S-S-），斷裂為巰基（-SH），常用于：

• 蛋白質(zhì)變性與復(fù)性實(shí)驗(yàn)（如 SDS-PAGE 中破壞蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)）；

• 維持酶的活性（部分酶需游離巰基保持活性）；

• 防止蛋白質(zhì)分子間因二硫鍵形成聚合體。

2. 抗氧化保護(hù)
   作為強(qiáng)還原劑，可清除體系中的氧自由基，保護(hù)敏感生物分子（如 DNA、RNA、酶）免受氧化損傷，常用于細(xì)胞裂解、核酸提取等實(shí)驗(yàn)。
3. 其他應(yīng)用

• 作為巰基化試劑，用于修飾蛋白質(zhì)或核酸的巰基基團(tuán)；

• 在抗體標(biāo)記、蛋白質(zhì)純化等實(shí)驗(yàn)中調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的還原環(huán)境。

三、使用方法

1. 溶液配制

• 常用濃度：0.1-10 mM（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整，如 SDS-PAGE 中常用 50 mM）。

• 配制方法：稱取適量 DTT，用去離子水或緩沖液（如 PBS、Tris-HCl）溶解，配制成儲(chǔ)存液（通常 1-10 M，分裝后 - 20℃冷凍保存，避免反復(fù)凍融）。

• 注意：DTT 溶液易被氧化，新鮮配制的溶液為無(wú)色，氧化后逐漸變?yōu)辄S色，此時(shí)還原能力下降，需重新配制。

2. 實(shí)驗(yàn)中的典型應(yīng)用

• SDS-PAGE 樣品處理：在蛋白質(zhì)樣品緩沖液中加入 DTT（終濃度 50 mM），煮沸 5-10 分鐘，使蛋白質(zhì)充分變性并還原二硫鍵，確保電泳結(jié)果準(zhǔn)確。

• 酶反應(yīng)體系：加入低濃度 DTT（0.1-1 mM）維持酶的活性（如限制性內(nèi)切酶、DNA 聚合酶等）。

• 蛋白質(zhì)復(fù)性：在復(fù)性緩沖液中加入 DTT（0.5-5 mM），幫助變性蛋白重新折疊，減少錯(cuò)誤二硫鍵的形成