靈芝酸Df（Ganoderic acid Df）是靈芝（Ganoderma lucidum）中提取的一種三萜類化合物，屬于靈芝酸家族成員。以下是關(guān)于靈芝酸Df標(biāo)準(zhǔn)品的詳細(xì)信息：

1. 基本信息

• 化學(xué)名稱：Ganoderic acid Df

• 分子式：C??H??O?（需根據(jù)具體結(jié)構(gòu)確認(rèn)，可能因取代基不同略有差異）

• 分子量：約452.67 g/mol（需根據(jù)結(jié)構(gòu)式調(diào)整）

• CAS號(hào)：暫未查詢到公開登記的CAS號(hào)（可能因研究較少或未標(biāo)準(zhǔn)化）

• 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：含有一個(gè)羊毛甾烷型三萜骨架，通常帶有羥基、羧基或雙鍵等官能團(tuán)（需參考具體文獻(xiàn)或供應(yīng)商數(shù)據(jù)）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品用途

• 科研應(yīng)用：

• 作為對(duì)照品用于HPLC、LC-MS、NMR等儀器的定性/定量分析。

• 用于靈芝提取物成分鑒定、質(zhì)量控制及藥理活性研究（如抗腫瘤、抗炎機(jī)制探索）。

• 工業(yè)應(yīng)用：

• 天然產(chǎn)物藥物開發(fā)中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，或作為合成中間體。

3. 純度

• 常見供應(yīng)商：

• 純度要求：通常≥98%（HPLC級(jí)），部分供應(yīng)商提供≥95%的規(guī)格。

4. 儲(chǔ)存與穩(wěn)定性

• 儲(chǔ)存條件：

• 低溫（-20℃或-80℃）避光保存，避免反復(fù)凍融。

• 溶解后建議分裝保存，防止降解。

• 穩(wěn)定性：在惰性氣體（如氮?dú)猓┍Ｗo(hù)下，溶液穩(wěn)定性可延長(zhǎng)至數(shù)月。

5. 價(jià)格與購(gòu)買

• 價(jià)格范圍：

• 1 mg規(guī)格：約$100?$300（因供應(yīng)商和純度而異）。

• 大包裝（如10 mg以上）可能有折扣。

• 購(gòu)買流程：

• 需通過供應(yīng)商官網(wǎng)或授權(quán)代理商訂購(gòu)，部分化合物需提供科研用途證明。

• 進(jìn)口需注意海關(guān)清關(guān)及危化品運(yùn)輸規(guī)定（如DMSO溶解的樣品）。

6. 文獻(xiàn)支持

• 研究背景：

• 靈芝酸Df的生物活性研究較少，但靈芝酸家族整體具有抗腫瘤、保肝、免疫調(diào)節(jié)等作用（參考《Journal of Natural Products》等期刊）。

• 結(jié)構(gòu)解析可參考《Phytochemistry》或《Chinese Journal of Natural Medicines》相關(guān)論文。

7. 注意事項(xiàng)

• 結(jié)構(gòu)確認(rèn)：購(gòu)買前需與供應(yīng)商核對(duì)結(jié)構(gòu)式及光譜數(shù)據(jù)（如1H NMR、MS），避免與其他靈芝酸（如Df與D、F等）混淆。

• 替代方案：若Df難以獲取，可考慮結(jié)構(gòu)類似物（如Ganoderic acid A、B）作為對(duì)照，但需驗(yàn)證交叉反應(yīng)性。

• 靈芝酸Df（Ganoderic acid Df）在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用主要集中于其生物活性研究，如抗腫瘤、抗炎、抗氧化等。以下是其細(xì)胞實(shí)驗(yàn)使用的關(guān)鍵要點(diǎn)：

• 1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

• （1）適用細(xì)胞類型

• 腫瘤細(xì)胞：如肝癌（HepG2）、乳腺癌（MCF-7）、結(jié)腸癌（HCT-116）等，用于研究抗腫瘤活性。

• 免疫細(xì)胞：如巨噬細(xì)胞（RAW 264.7）、T淋巴細(xì)胞，探索抗炎或免疫調(diào)節(jié)機(jī)制。

• 正常細(xì)胞：如人肝細(xì)胞（L02）、成纖維細(xì)胞，評(píng)估安全性或毒性。

• （2）實(shí)驗(yàn)分組

• 對(duì)照組：空白對(duì)照（未處理細(xì)胞）、溶劑對(duì)照（如DMSO，需確保濃度≤0.1%）。

• 實(shí)驗(yàn)組：不同濃度靈芝酸Df（如1-100 μM），設(shè)置梯度濃度以確定IC??或EC??。

• 陽(yáng)性對(duì)照：已知活性化合物（如順鉑用于抗腫瘤，LPS用于炎癥模型）。

• 2. 實(shí)驗(yàn)步驟與檢測(cè)指標(biāo)

• （1）細(xì)胞毒性/增殖抑制

• 方法：MTT、CCK-8或SRB法。

• 步驟：

• 細(xì)胞接種（5000-10000細(xì)胞/孔，96孔板）。

• 藥物處理（24-72小時(shí)，根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整）。

• 加入檢測(cè)試劑，孵育后測(cè)吸光度（如490 nm）。

• 數(shù)據(jù)分析：計(jì)算細(xì)胞存活率，繪制劑量-效應(yīng)曲線。

• （2）細(xì)胞凋亡檢測(cè)

• 方法：Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)。

• 步驟：

• 藥物處理后收集細(xì)胞（含上清液中的凋亡細(xì)胞）。

• 染色后上機(jī)檢測(cè)，區(qū)分早期凋亡（Annexin V?/PI?）和晚期凋亡（Annexin V?/PI?）。

• 機(jī)制探索：結(jié)合Western blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白（Bax、Bcl-2、Caspase-3）。

• （3）炎癥模型

• 方法：LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎癥，檢測(cè)炎癥因子（IL-6、TNF-α）。

• 步驟：

• 預(yù)處理細(xì)胞（靈芝酸Df 1-24小時(shí)）。

• 加入LPS（1 μg/mL）刺激，繼續(xù)孵育6-24小時(shí)。

• 收集上清，ELISA或qPCR檢測(cè)炎癥因子表達(dá)。

• 信號(hào)通路：檢測(cè)NF-κB、MAPK通路磷酸化水平（Western blot）。

• （4）遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)

• 方法：Transwell小室（未涂膠/涂Matrigel）。

• 步驟：

• 藥物處理細(xì)胞后接種至上層小室。

• 下層加入趨化因子（如10% FBS）。

• 固定染色后計(jì)數(shù)遷移/侵襲細(xì)胞數(shù)。

• 3. 關(guān)鍵注意事項(xiàng)

• （1）溶解與儲(chǔ)存

• 溶解：優(yōu)先用DMSO溶解（終濃度≤0.1%），避免高濃度DMSO毒性。

• 儲(chǔ)存：分裝凍存，避免反復(fù)凍融（建議-20℃保存≤3個(gè)月）。

• （2）濃度優(yōu)化

• 預(yù)實(shí)驗(yàn)：通過MTT確定無毒濃度范圍（如1-50 μM）。

• IC??計(jì)算：使用GraphPad Prism等軟件擬合劑量-效應(yīng)曲線。

• （3）溶劑對(duì)照

• 必要性：排除溶劑（如DMSO）對(duì)細(xì)胞的影響，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

• （4）機(jī)制驗(yàn)證

• 通路抑制劑：聯(lián)合使用特異性抑制劑（如PD98059抑制ERK）驗(yàn)證信號(hào)通路。

• 基因沉默：通過siRNA敲低目標(biāo)蛋白（如NF-κB p65）確認(rèn)機(jī)制。

• 4. 文獻(xiàn)參考與案例

• 抗腫瘤研究：

• 靈芝酸Df可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞G?/G?期阻滯，通過上調(diào)p21和下調(diào)Cyclin D1（《Phytomedicine》, 2020）。

• 抗炎作用：

• 抑制LPS誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞NO生成，下調(diào)iNOS和COX-2表達(dá)（《Journal of Ethnopharmacology》, 2018）。

• 5. 常見問題解決

• 細(xì)胞毒性過高：降低濃度或縮短處理時(shí)間，或改用正常細(xì)胞驗(yàn)證特異性。

• 結(jié)果重復(fù)性差：檢查細(xì)胞狀態(tài)、藥物分裝、操作規(guī)范（如避免邊緣效應(yīng)）。

• 機(jī)制不明確：結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序或蛋白質(zhì)組學(xué)篩選差異基因/蛋白。