產(chǎn)品概述

腸激酶（ Enterokinase ，EK）是一種常見(jiàn)的絲氨酸蛋白酶，可以專(zhuān)一識(shí)別 DDDDK 序列并在賴氨酸殘基的C 端進(jìn)行切割 。本品在天然腸激 酶輕鏈片段的基礎(chǔ)上進(jìn)行突變改造，具有更高的比活和酶切特異性，可以在較寬的 pH 范圍（4.5-9.5）和溫度范圍（4 ~ 45℃) 內(nèi)進(jìn)行有效 切割。

產(chǎn)品組分

1 、高特異性：諾唯贊自主研發(fā)改造，針對(duì)司美格魯肽，RM1025特異性顯著優(yōu)于普通腸激酶RM1011；

2、產(chǎn)能充足：5噸級(jí)生產(chǎn)線多批次生產(chǎn)，批產(chǎn)達(dá)億U級(jí)別，多批次生產(chǎn)驗(yàn)證質(zhì)量穩(wěn)定；

3 、GMP級(jí)：生產(chǎn)過(guò)程符合GMP要求；

4 、質(zhì)量文件完整：可保障無(wú)動(dòng)物源性、無(wú)外源性病毒污染等，質(zhì)量文件齊全。

5、質(zhì)檢體系完善：配套專(zhuān)一性酶活、酶殘留檢測(cè)試劑盒，提供入場(chǎng)檢支撐、雜質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)控制策略；

6、規(guī)格定制：規(guī)格可根據(jù)客戶需求定制。

產(chǎn)品信息

保存條件

儲(chǔ)存條件 ：-30 ~ -15℃ ;

復(fù)驗(yàn)期：24 個(gè)月。

產(chǎn)品應(yīng)用范圍

1 、用于切除重組蛋白 N 端融合標(biāo)簽；

2 、用于活化胰蛋白酶原；

3 、生物制藥領(lǐng)域常用于重組蛋白 、多肽類(lèi)藥物的生產(chǎn)制備 ，例如 BNP 、GLP-1 及其類(lèi)似物等。

建議反應(yīng)體系

酶切體系 ：1 U 可酶切融合蛋白 500-2000 μg ，pH 7.5-9.0；

反應(yīng)時(shí)間：25℃反應(yīng)過(guò)夜或者 24 h ，用 SDS-PAGE  或者  HPLC 檢測(cè)酶切效果；

4℃反應(yīng)酶切 ，需要將酶切時(shí)間延長(zhǎng)至 48-64 h ，或增加 2-3 倍酶量。

注意事項(xiàng)

1 、在＞200 mM 咪唑 ，或＞200 mM NaCl ，或＞5%甘油條件下 ，酶切效果受影響 ，可將樣品進(jìn)行稀釋或者透析 ，再進(jìn)行酶切 。如果樣品 溶液中含有上述成分中的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間，也可達(dá)到較好的酶切效果。磷酸鹽對(duì) Enterokinase 發(fā)揮活性有影響 ，因此盡量避免酶切體系內(nèi)磷酸鹽的存在。

2 、本司生產(chǎn)的腸激酶比活高 ，使用過(guò)程中加量較少 ，可不考慮去除 。如果需要進(jìn)一步降低殘留水平，建議的去除方法如下：

a. 使用親和層析 ，可以利用苯甲脒親和填料純化去除 ，由于腸激酶是一種絲氨酸蛋白酶 ，可以在純化時(shí)與苯甲脒填料結(jié)合 ，從而達(dá)到 去除目的；

b. 使用離子交換層析 ，可以利用目的蛋白與腸激酶電荷差異將二者進(jìn)行分離；

c. 本產(chǎn)品含有 His標(biāo)簽 ，可使用 Ni 柱親和層析吸附去除。

3 、推薦反應(yīng)體系是基于我司實(shí)驗(yàn)條件下所獲得 ，使用時(shí)可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。