脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FAS）活性試劑盒說明書 

分光光度法 

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定 

測定意義：

FAS 是脂肪酸合成關(guān)鍵酶，催化乙酰輔酶 A 和丙二酰輔酶 A 而生成長鏈脂肪酸。FAS 普遍表達于各 種組織細胞中，在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。 

測定原理：

FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成長鏈脂肪酸和 NADP +；NADPH 在 340nm 有吸收峰， 而 NADP +沒有；通過測定 340nm 光吸收下降速率，計算 FAS 活性。

FA009-50T/48S: 

試劑一：液體 50ml×1 瓶，－20℃保存。用前 1 d 取出置于 4℃充分解凍后混勻。

試劑二：粉劑×1 瓶。臨用前加入 1100 μl 試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍 融。 試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 1100 μl 

試劑三，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存， 禁止反復(fù)凍融。 試劑五：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 2100μl 

試劑五，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存， 禁止反復(fù)凍融。 

自備儀器和用品： 

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1ml 石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。 

粗酶液提?。?/span>

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 試劑 一）進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心 40min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（10 4個）：試劑一體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加 入 1ml 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 12000g， 4℃，離心 40min，取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定。 

FAS 測定操作： 

1. 分光光度計預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長到 340 nm，蒸餾水調(diào)零。 

2. 試劑四置于 40℃水浴中預(yù)熱 30 min。

3. 測定管：在 1ml 石英比色皿中依次加入 100μl 上清液、20μl 試劑二、20μl 試劑三、820μl 試劑四和 40μl 試劑五，迅速混勻后于 340nm 處測定吸光值，記錄第 30s 和 90s 時吸光值，分別記錄為 A1 和 A2。△A 測 =A1-A2。