簡(jiǎn)要描述
在細(xì)胞生物學(xué)中，缺氧是一種普遍存在的現(xiàn)象，比如在神經(jīng)疾病等病理狀態(tài)下。為了深入了解缺氧的生物學(xué)機(jī)制及其在疾病發(fā)展中的作用，科學(xué)家們開發(fā)了多種缺氧探針。Hypoxyprobe-F6（CCI-103F）研究缺氧的工具之一。
Hypoxyprobe-F6（CCI-103F）是一種用于檢測(cè)缺氧細(xì)胞的化合物。它能與在缺氧條件下產(chǎn)生的生物分子反應(yīng)，形成穩(wěn)定的加合物，從而使研究者能夠準(zhǔn)確識(shí)別和定量缺氧區(qū)域。該探針在細(xì)胞和組織切片中應(yīng)用較廣，是缺氧研究的檢測(cè)手段之一。
工作機(jī)制
Hypoxyprobe-F6的工作機(jī)制基于其與組織中硫醇類化合物的反應(yīng)。在低氧環(huán)境下，Hypoxyprobe-F6被還原激活并與細(xì)胞內(nèi)的巰基反應(yīng)，形成特異性的加合物。這些加合物可以通過(guò)抗體染色等免疫檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行可視化，從而在組織切片上明確標(biāo)記缺氧區(qū)域。通過(guò)這種方式，研究者能夠獲得有關(guān)缺氧的定量和定性數(shù)據(jù)。
實(shí)驗(yàn)流程
使用Hypoxyprobe-F6進(jìn)行缺氧檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟相對(duì)簡(jiǎn)單。
1. 將Hypoxyprobe-F6通過(guò)注射等方式引入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)。
2. 收集組織樣本并進(jìn)行處理，使用特異性抗體進(jìn)行染色。
3. 通過(guò)顯微鏡觀察和分析缺氧細(xì)胞的分布情況。
缺氧探針試劑盒核心組分為：缺氧探針（Pimonidazole 或CCI-103F）和缺氧探針的抗體。不同試劑盒中的探針和抗體標(biāo)記不同（可應(yīng)用于免疫熒光（IF），免疫組化（IHC），WB或流式細(xì)胞分析（FC））。
注意事項(xiàng)
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建議腹腔注射，劑量范圍1 - 60 mg/kg（根據(jù)模型調(diào)整），注射后1 - 3小時(shí)采集樣本。
體外實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞培養(yǎng)液中使用濃度建議10 - 100 μM，作用時(shí)間1 - 4小時(shí)。
檢測(cè)方法：需配合抗Hypoxyprobe抗體及二抗體系，實(shí)驗(yàn)前需排除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶干擾。
關(guān)鍵字： Hypoxyprobe-F6;缺氧探針F6（CCI-103F）;CCI-103F;
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