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古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實(shí)時熒光PCR法)
  • 古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實(shí)時熒光PCR法)

古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒

價格 2000
包裝 1cells/瓶
最小起訂量 1cells/瓶
發(fā)貨地 上海
更新日期 2025-08-01
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實(shí)時熒光PCR法)CAS:
品牌: 雅吉生物產(chǎn)地: 上海
純度規(guī)格: 99%產(chǎn)品類別: 細(xì)胞 細(xì)胞系
檢測方法: 實(shí)時熒光PCR法種屬反應(yīng)性:
檢測時間: 貨號: 古典豬瘟病毒熒光
用途范圍: 科研實(shí)驗(yàn)規(guī)格: 50T
是否進(jìn)口:
2025-08-01 古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實(shí)時熒光PCR法) 1cells/瓶/2000RMB 2000 雅吉生物 上海 99% 細(xì)胞 細(xì)胞系

古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實(shí)時熒光PCR法)

使用說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實(shí)時熒光PCR法)

英文名稱:Classieal Swine Fever virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于古典豬瘟病毒檢測,可用于臨床古典豬瘟病毒感染的輔助診斷,但不作確診使用。

【原    理】

本試劑盒針對古典豬瘟病毒的高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物和探針,在反應(yīng)體系中含古典豬瘟病毒基因組模板的情況下,PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道信號進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出,實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析。

試劑盒組成

序號

組成

50T/盒

1

CSFV  RT-PCR反應(yīng)液

875 μL×1管

2

CSFV  混合酶液

125 μL×1管

3

CSFV  陽性對照

 40 μL×1管

4

CSFV  陰性對照

 40 μL×1管

5

說明書

1份

注:陰性對照為滅菌純水,陽性對照為含古典豬瘟病毒靶基因的質(zhì)粒。

【儲存條件及有效期】避光-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,有效期12個月。

【適用儀器】 ABI7500、羅氏 96/480、安捷倫、伯樂、國產(chǎn)博日、宏石等各種熒光定量 PCR 儀。

【樣本要求】

1.血液或血清樣品:使用無菌注射液抽取樣品置于離心管中待檢。

2.肌肉或內(nèi)臟樣品:取少量樣品(23克)于研缽或勻漿器中研磨,然后將研磨勻漿轉(zhuǎn)入無菌離心管中,3000rpm/min 離心10分鐘取上清待檢。

3.應(yīng)避免標(biāo)本間交叉污染。

4.標(biāo)本收集后可立即檢測;若不能立即檢測,可置于2~8℃冷藏過夜保存;如需長期保存,標(biāo)本應(yīng)凍存于-80以下,避免反復(fù)凍融。

【檢驗(yàn)方法】

1. 試劑準(zhǔn)備(試劑準(zhǔn)備區(qū))

1)從冰箱中取出試劑盒, 從試劑盒中取出實(shí)驗(yàn)所需試劑,充分融化混勻并瞬時離心以去除管壁附著液體。

2)核算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需要的反應(yīng)數(shù)(n),并根據(jù)如下表所示反應(yīng)體系計算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需要的各種試劑量。

n =陰性對照數(shù)(1T)+陽性對照數(shù)(1T)+誤差預(yù)留量(1T)+樣本數(shù)

單反液配制表(每份)

RT-PCR反應(yīng)液

17.5 μL

混合

 2.5 μL

 

3)在無菌離心管中加入上述試劑,充分混勻后瞬時離心。按照20 μL/管分裝量將試劑分裝至PCR反應(yīng)管。

2.樣本準(zhǔn)備(樣本處理區(qū))

QIAGEN、Roche公司RNA提取試劑盒提取RNA,具體操作按照其試劑盒說明書操作。

3.加樣(樣本處理區(qū))

在上述制備好的PCR反應(yīng)樣本管中分別加入處理好的待測標(biāo)本RNA各5 μl、終體積25 μl/管,蓋好PCR反應(yīng)蓋混勻后瞬時低速離心,轉(zhuǎn)移到PCR儀器上。陰性對照和陽性對照管則各加5 μL試劑盒自帶的陰性對照或陽性對照品,終體積為25 μl/管,蓋好PCR反應(yīng)蓋混勻后瞬時低速離心,轉(zhuǎn)移到PCR儀器上。

4. PCR(PCR擴(kuò)增區(qū))

1)取樣本處理區(qū)準(zhǔn)備好的PCR反應(yīng)管,放置在實(shí)時熒光定量PCR儀樣品槽相應(yīng)位置,并記錄放置順序。

2)按下表設(shè)置儀器核酸擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

反應(yīng)體積

25 μL

通道選擇

FAM通道采集古典豬瘟病毒熒光信號

PCR

反應(yīng)

條件

步驟

條件

循環(huán)數(shù)

反轉(zhuǎn)錄

    50℃:10分鐘(min)

1

預(yù)變性

95℃:3分鐘(min)

1

PCR擴(kuò)增

95℃:5秒(s)

40

55℃:40秒(s)

(此階段結(jié)束時采集熒光信號)

注:ABI系列熒光PCR儀在設(shè)置時不選ROX校正,設(shè)置淬滅基團(tuán)選擇None。

【參考值(參考范圍)】

1.試劑盒有效性判定:

 1)陽性對照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。

 2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。

2.標(biāo)本結(jié)果判定:

1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。

2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。

3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

通道及檢測結(jié)果

標(biāo)本檢測結(jié)果解釋

FAM

陽性(+)

標(biāo)本中檢出古典豬瘟病毒RNA

陰性(-)

標(biāo)本中未檢出古典豬瘟病毒RNA

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1. 當(dāng)檢測樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒的最低檢出限時可能會發(fā)生假陰性的結(jié)果。

2. 被檢樣本在采集、運(yùn)輸、儲存以及處理過程中操作方式不當(dāng)容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

3. 樣本在采集、運(yùn)輸、儲存以及處理過程中發(fā)生交叉污染,則容易得到假陽性結(jié)果。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 產(chǎn)品的最低檢出限為103Copies/mL,產(chǎn)品CV值≤3%。

【注意事項(xiàng)】

1. 使用本試劑盒的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)嚴(yán)格按照國家有關(guān)部分頒布的有關(guān)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范進(jìn)行管理

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理;

3. 各區(qū)域物品均為專用,不得交叉使用,以免污染;檢測結(jié)束后,應(yīng)立即對工作臺清潔;

4. 吸取反應(yīng)液時,應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡 PCR 儀前,應(yīng)注意檢查各反應(yīng)管是否蓋緊,以免液體蒸發(fā)造成結(jié)果不準(zhǔn)確

5. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心;

6. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放;

7. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記;

8. 檢測過程中使用過的吸頭,應(yīng)直接打到盛有 10%次氯酸的廢物缸內(nèi),檢測結(jié)束的PCR 反應(yīng)管,切忌開蓋,并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄;工作臺及各種實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)定期用 10%次氯酸、75%酒精或紫外燈進(jìn)行消毒;

9. 儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用;并在有效期內(nèi)使用

 

 

 

 

 



關(guān)鍵字: 古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒;古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒;古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒;實(shí)時熒光PCR法;ATCC引種;

公司簡介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。 公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時,也建立了一套集技術(shù)支持,物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶,雅吉生物的試劑盒,在國內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,深受廣大科研人員好評,先后在權(quán)威雜志文章中被引用。 本公司鄭重承諾:質(zhì)量保證、供貨及時、服務(wù)周到。
成立日期 2011-04-17 (15年) 注冊資本 50.000000萬人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 100萬以內(nèi)
主營行業(yè) 抗體,抗體 經(jīng)營模式 試劑,定制,試劑,定制
  • 上海雅吉生物科技有限公司
VIP 4年
  • 公司成立:15年
  • 注冊資本:50.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產(chǎn)品:抗體,細(xì)胞,生物試劑等
  • 公司地址:上海市閔行區(qū)元江路5500號第 1幢5658室
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