中文名：Lipo2000轉染試劑
英文名：Lipo2000 Transfection Reagent
貨號：L266177
包裝：1.5ml、0.75ml
存儲溫度：2-8°C儲存,避光
產品介紹：
產品說明
Lipo2000轉染效率介于Lip2000和Lip3000之間，毒性更低，轉染效率更高，是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑。適合于將核酸(DNA和RNA)轉染入真核細胞，具有低細胞毒性；對多種類型的細胞和培養(yǎng)板都具有高轉染效率；轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點。
適用范圍：貼壁細胞和懸浮細胞（哺乳動物細胞系）的轉染。
質粒DNA的轉染
對大多數(shù)細胞來說，DNA(μg)與Lipo2000 (μl)的比例為1:2~1:3。轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平，并能減少細胞毒性。
1.?以24孔板為例
貼壁細胞： 轉染前一天，用500 μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種0.5～2×10^5細胞，使之第二天能達到70-90%匯合。
懸浮細胞：在準備DNA-Lip2000復合物之前，用500 μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種4～8×10^5細胞即可。
2.?對每個轉染樣品，進行以下操作
a.?在eppendorf管里分別加入50 μl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 μg DNA輕柔混勻，制成DNA稀釋液。
b.?在另一個eppendorf管里分別加入50μl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 μl Lipo2000(注意用前先混勻)，輕柔混勻，制成Lip2000 稀釋液，室溫靜置5分鐘。
c.?將DNA稀釋液和Lip2000稀釋液混合，輕柔混勻，室溫靜置20分鐘， 形成DNA-Lip2000復合物。DNA-Lip2000復合物在室溫下可穩(wěn)定存在6小時。
3.?將DNA-Lip2000復合物加入到接種好的細胞中，將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動，使復合物分散均勻。
4.?在37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6小時后更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)18～48小時。
5.?如果要篩選穩(wěn)定細胞株，則在轉染24小時后將細胞按照1:10或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中，第二天加入選擇性培養(yǎng)基進行篩選。
質粒DNA轉染的優(yōu)化 為達到最高的轉染效率和降低細胞毒性的影響，可以對DNA和Lip2000的比例以及細胞密度進行優(yōu)化，一般在1:0.5~1:5的范圍內優(yōu)化DNA (μg)和Lip2000 (μl) 的比例。
不同細胞培養(yǎng)板中轉染時培養(yǎng)基、核酸及Lipo2000用量
常見細胞的轉染效率（僅供參考，實驗條件不同轉染效率會有差別）
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關鍵字： Lipo2000轉染試劑;Lipo2000 Transfection Reagent
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