【儲存條件及有效期】 

保存條件：-25 °C~ -15 °C，有效期為6個月； 運輸條件：試劑盒需在-15℃以下運輸；

【檢驗方法】  操作步驟 

1. 核酸提取 采用核酸提取試劑盒或者自動化核酸提取儀提取各類樣本中的待檢 DNA/RNA，若無需立即使用，需要放置-80℃保存。 

2. 試劑準備 取出試劑盒中引物混合液和酶混合液置于室溫溶解，混勻后瞬時離心備用。 計算樣本、陰性和陽性對照的數(shù)量，記為N，按照N+1的數(shù)量配置混合液 （每個樣本需7μL引物混合液 +11μL酶混合液），充分混勻后瞬時離心備用。 將混勻好的反應(yīng)混合液按每個樣本18μL分裝至相應(yīng)的PCR管中，轉(zhuǎn)移至樣 本制備區(qū)。 

 3. 加樣 向分裝好的PCR反應(yīng)管中分別加入2μL樣本提取核酸、無酶水陰性對照和 陽性對照（單個反應(yīng)總體積共20μL）。加樣完成后，蓋緊PCR管蓋，短暫 離心，確認消除氣泡后轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)進行PCR反應(yīng)。

 4. qPCR反應(yīng) 將樣本放入擴增儀，設(shè)置樣本名稱、陰性對照和陽性對照，熒光通路選 擇SYBR。

【注意事項】 

1. 酶混合物及引物混合物配制成的qPCR反應(yīng)液對溫度敏感，容易失 活，使用時應(yīng)置于冰上，反復凍融不超過5次；

2. 本品保存不當或者運輸不當可能會導致試劑失活，出現(xiàn)假陰性的結(jié) 果；

3. 不同核酸提取方法提取效率不同，可能會導致假陰性的結(jié)果；

4. 病原體流行株變異可能導致假陰性的結(jié)果；

5. 本試劑盒僅用于科研用途，使用前請仔細閱讀說明書；

6. 實驗室管理應(yīng)嚴格按照PCR基因擴增實驗室的管理規(guī)范，實驗 人員必須進行專業(yè)培訓，實驗過程嚴格分區(qū)；使用一次性消耗品， 各區(qū)各階段消耗品不得混用。