產(chǎn)品描述
Picogreen是一種極為靈敏的熒光核酸染料，常用于雙鏈DNA的定量檢測。歷來DNA濃度的測定在cDNA文庫的構(gòu)建，DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物的估測等領(lǐng)域中具有重要意義，疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測更是直接關(guān)系到人類的健康。
Picogreen dsDNA定量檢測：Picogreen僅在與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光，且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比，在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，可以選擇性地檢測低至25pg/ml的dsDNA。該分析在三個數(shù)量級范圍內(nèi)呈線性，且?guī)缀鯚o序列依賴性，可以精確地測量多個來源的DNA，包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。
相比傳統(tǒng)的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下優(yōu)勢：
①靈敏度高：數(shù)量級較UV吸光讀數(shù)更敏感，可節(jié)省寶貴的樣品；
②特異性強(qiáng)：在等摩爾的RNA存在的條件下，對dsDNA具有特異性；
③耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA。
④易于使用——只需在樣品中加入染料，等待5分鐘，然后讀數(shù)即可，且適用于96和384孔板；與大多數(shù)基于熒光的酶標(biāo)儀和熒光計兼容。
⑤適用范圍廣：可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。
我司可根據(jù)用戶需求提供多種規(guī)格的Picogreen雙鏈DNA檢測試劑（PicoGreen dsDNA Reagent），本品以溶于DMSO的母液形式提供，濃度為0.1mg/ml。若按照2ml反應(yīng)體系來計算（比色皿），10×100 μL規(guī)格可做200次反應(yīng)；若按照200μl反應(yīng)體系來計算（96孔板），10×100 μL規(guī)格可做2000次反應(yīng)；單次反應(yīng)體系取決于熒光檢測儀器。
保存與運(yùn)輸方法
保存：2-8℃避光保存，亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。
運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。
應(yīng)用示例（熒光定量）：
應(yīng)用示例（picogreen的熒光染色）
文獻(xiàn)來源1）：Ho SS, Zhang WY, Tan NY, Khatoo M, Suter MA, Tripathi S, Cheung FS, Lim WK, Tan PH, Ngeow J, Gasser S. The DNA Structure-Specific Endonuclease MUS81 Mediates DNA Sensor STING-Dependent Host Rejection of Prostate Cancer Cells. Immunity. 2016 May 17;44(5):1177-89. doi: 10.1016/j.immuni.2016.04.010. Epub 2016 May 10. PMID: 27178469.
Fig. Genome-Derived DNA Accumulates in the Cytosol of Prostate Cancer Cells
(A) Murine TRAMP-C2, human DU145 and human PC-3 prostate cancer cells were labeled with antibodies against dsDNA (red) and the mitochondrial marker COX IV (green) in the presence of DAPI (blue). Z stacks were acquired by confocal microscopy and 3D iso-surface rendered using Imaris software to exclude mitochondrial and nuclear DNA.
(B) TRAMP-C2, DU145, and PC-3 cells were labeled with 3 ml/ml of the dsDNA-specific dye PicoGreen (green) for 1 hr and with 100 nM mitochondria-specific dye MitoTracker (red) for 30 min. Z stacks were acquired by confocal microscopy and 3D iso-surface rendered using Imaris software to exclude mitochondrial DNA.
附表 PicoGreen定量耐受的污染物列表
| 物質(zhì)名稱 | 耐受濃度 | 信號變化百分比 |
| Salts |
| Ammonium acetate | 50 mM | 3% decrease |
| Sodium acetate | 30 mM | 3% increase |
| Sodium chloride | 200 mM | 30% decrease |
| Zinc chloride | 5 mM | 8% decrease |
| Magnesium chloride | 50 mM | 33% decrease |
| Urea | 2 M | 9% increase |
| Organic Solvents |
| Phenol | 0.1% | 13% increase |
| Ethanol | 10% | 12% increase |
| Chloroform | 2% | 14% increase |
| Detergents |
| Sodium dodecyl sulfate | 0.01% | 1% decrease |
| Triton X-100 | 0.1% | 7% increase |
| Proteins |
| Bovine serum albumin | 2% | 16% decrease |
| IgG | 0.1% | 19% increase |
| Other Compounds |
| Polyethylene glycol | 2% | 8% increase |
| Agarose | 0.1% | 4% increase |
注意事項
1） Picogreen含DMSO（已知有毒試劑），操作時請注意防護(hù)。
2） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字： Picogreen;雙鏈DNA檢測試劑;Picogreen dsDNA定量檢測;
主要以熒光探針，分子探針，核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測、活體示蹤，抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。