"GP5d:人結(jié)腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KYSE-270細胞類似產(chǎn)品：：MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞

PL-5細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞

NCC-IT細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞

NEC8細胞類似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：結(jié)腸癌；女性

GP5d:人結(jié)腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

NEC細胞類似產(chǎn)品：：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞

BEL 7402細胞類似產(chǎn)品：：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞

COV 434細胞類似產(chǎn)品：：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

NCI-H747細胞類似產(chǎn)品：：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞

EVSA/T細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞

McCoy B細胞類似產(chǎn)品：：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞

NUGC2細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞

SK.MEL.2細胞類似產(chǎn)品：：Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞

Human fetal lung fibroblast 1細胞類似產(chǎn)品：：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞

PIEC細胞類似產(chǎn)品：：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞

Hi-five細胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

BNCL2細胞類似產(chǎn)品：：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞

BE2-M17細胞類似產(chǎn)品：：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞

PTK 1細胞類似產(chǎn)品：：Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞

IHH細胞類似產(chǎn)品：：HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞

WISH細胞類似產(chǎn)品：：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞

HuCC-T1細胞類似產(chǎn)品：：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞

YAC細胞類似產(chǎn)品：：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞

TE32細胞類似產(chǎn)品：：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞

TE32細胞類似產(chǎn)品：：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞

Colo741細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞

NCI-H650細胞類似產(chǎn)品：：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞

HeLa 229細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞

Hs 832(C).T細胞類似產(chǎn)品：：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞

LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞類似產(chǎn)品：：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞

MC-116細胞類似產(chǎn)品：：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞

BOWES細胞類似產(chǎn)品：：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞

GP5d:人結(jié)腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

H-2087細胞類似產(chǎn)品：：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞

H-EMC-SS細胞類似產(chǎn)品：：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞

NCIH2029細胞類似產(chǎn)品：：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞

CCD-841CoTr細胞類似產(chǎn)品：：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞

MAEC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞

LWnt3A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞

GC-1spg細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞

B16-F10-BL6細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞

WB-F344細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞

RMG-I細胞類似產(chǎn)品：：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞

SUM 102PT細胞類似產(chǎn)品：：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞

CCD-19Lu細胞類似產(chǎn)品：：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞

KLN 205細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞

A2780 CP70細胞類似產(chǎn)品：：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞

H378細胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞

DHL-16細胞類似產(chǎn)品：：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞

Pa14C細胞類似產(chǎn)品：：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞

Strain L-929細胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞

H-727細胞類似產(chǎn)品：：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞

CL40細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞

NCI-SNU-407細胞類似產(chǎn)品：：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞

PLC8024細胞類似產(chǎn)品：：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞

293/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞

HANK細胞類似產(chǎn)品：：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞

RCF細胞類似產(chǎn)品：：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞

JIMT-1細胞類似產(chǎn)品：：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞

C-33-A細胞類似產(chǎn)品：：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞

WI-38細胞類似產(chǎn)品：：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞

H-2106細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞

MESSA Dx5細胞類似產(chǎn)品：：PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞

AD-293細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Hs 888Lu細胞

SU-DHL-6細胞類似產(chǎn)品：：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞

MALME.3M細胞類似產(chǎn)品：：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞

PAI細胞類似產(chǎn)品：：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞

MCF/Adr細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞

CG4細胞類似產(chǎn)品：：PaTu 8988s細胞、B16/F1細胞、Microbiological Associates-104細胞

JROECL 33細胞類似產(chǎn)品：：HOCF細胞、Panc 5.04細胞、TE-85細胞

McCoy B細胞類似產(chǎn)品：：SNU16細胞、MMAc.SF細胞、HCC0095細胞

CV 1細胞類似產(chǎn)品：：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞

Human Melanoma Cell Bowes細胞類似產(chǎn)品：：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞

3T3J2細胞類似產(chǎn)品：：UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞

H889細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞

SEG1細胞類似產(chǎn)品：：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞

Panc02.03細胞類似產(chǎn)品：：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞

HGC-27細胞類似產(chǎn)品：：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞

C3H10T1/2CL8細胞類似產(chǎn)品：：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞

HGSMC細胞類似產(chǎn)品：：TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞

5-8F細胞類似產(chǎn)品：：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞

NCI-H2122細胞類似產(chǎn)品：：R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞

16HBE140細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞

HCC-2108細胞類似產(chǎn)品：：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞

Hs 729.T細胞類似產(chǎn)品：：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞

A-204細胞類似產(chǎn)品：：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞

SNU-5細胞類似產(chǎn)品：：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞

HEK 293FT細胞類似產(chǎn)品：：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞

TE 85.T細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞

RT 112細胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞

RT 112細胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞

2T細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞

NEC-8細胞類似產(chǎn)品：：TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞

LICR-LON-HN6細胞類似產(chǎn)品：：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞

MDA-MB-231 #4175細胞類似產(chǎn)品：：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞

MAEC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞

H2.35細胞類似產(chǎn)品：：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞

NCIH748細胞類似產(chǎn)品：：A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞

MLA144細胞類似產(chǎn)品：：HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞

JROECL 19細胞類似產(chǎn)品：：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞

H2023細胞類似產(chǎn)品：：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞

FAO-1細胞類似產(chǎn)品：：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞

SCC7細胞類似產(chǎn)品：：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞

H2126細胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞

RH30SJ細胞類似產(chǎn)品：：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞

EOC20細胞類似產(chǎn)品：：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞

IHH4細胞類似產(chǎn)品：：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞

B/C3T3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞

H64細胞類似產(chǎn)品：：EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞

GM03320細胞類似產(chǎn)品：：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞

SK-Mel1細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞

SK-Mel1細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞

RM1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞

SNU-C1細胞類似產(chǎn)品：：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞

GP5d:人結(jié)腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SR細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞

HCC-1806細胞類似產(chǎn)品：：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞

C32r細胞類似產(chǎn)品：：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞

ETCC-007細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞

MS-751細胞類似產(chǎn)品：：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞

C22細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞

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