慢病毒感染增強試劑盒

一、產(chǎn)品簡介。
本產(chǎn)品是一款旨在增強慢病毒感染效果的試劑,與經(jīng)典的慢病毒感染增強試劑 Polybrene 相比,感染效率提高 4-8 倍。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運輸,根據(jù)各組份保存條件分開保存,有效期 6 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本產(chǎn)品增強慢病毒感染效果顯著,是常規(guī)試劑的 4-8 倍。
2. 本產(chǎn)品對大多數(shù)細胞沒有毒性。
四、使用說明。
1. 細胞培養(yǎng)。細胞接種到 6 孔培養(yǎng)板,2 ml/孔,24 h 后細胞密度為 30-50%。(細胞密度太大不利于病毒感染,細胞密度請盡量保持在 70%以下)
2. 慢病毒感染。棄細胞培養(yǎng)液,加入含有慢病毒的細胞培養(yǎng)上清,1 ml/孔。
3. 慢病毒感染增強試劑處理。準備無菌 EP 管(1.5 ml),加入 880 μl 細胞培養(yǎng)液,4 μl Reagent A、16 μl Reagent B、100 μl Reagent C,混勻,加入細胞中,與先前加入的 1 ml 含慢病毒的細胞培養(yǎng)上清混合,保持 2 ml 培養(yǎng)體系。
4. 換液。慢病毒感染 24 h 后,更換成新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng) 48 h。中間若細胞生長較快,應根據(jù)細胞生長情況和培養(yǎng)液顏色變化隨時更換細胞培養(yǎng)液,保證良好的細胞生長狀態(tài)。
5. 檢測。慢病毒感染 72 h,利用熒光顯微鏡檢測綠色熒光蛋白(GFP)表達情況,判斷慢病毒感染效果,或利用其他技術(shù)檢測目的蛋白表達水平。
五、注意事項。
1. Reagent A 和 Reagent C 置于 4 ℃保存,嚴禁凍存,否則失效。
2. Reagent B 在-80 ℃保存 6 個月, -20 ℃保存 1 個月。
3. 慢病毒感染實驗中請使用慢病毒滴度高的細胞培養(yǎng)上清,或純化的慢病毒溶液,以保證實驗效果。慢病毒滴度較低時增強效果不明顯。
4. 特殊細胞在使用本產(chǎn)品時若出現(xiàn)細胞毒性,可以按照比例減少各試劑用量。
5. 本產(chǎn)品為無菌包裝,使用時請注意保持無菌狀態(tài),以免導致細胞污染。
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