"OE33:人食管腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HL-60細胞類似產(chǎn)品：：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞

H4細胞類似產(chǎn)品：：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞

B16 F10細胞類似產(chǎn)品：：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞

CTLL-2細胞類似產(chǎn)品：：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

OE33:人食管腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SKLMS1細胞類似產(chǎn)品：：SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞

CAL78細胞類似產(chǎn)品：：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞

NCIH1793細胞類似產(chǎn)品：：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

CoCL3細胞類似產(chǎn)品：：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞

GLRK 13細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞

RPMI7951細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞

GC1-SPG細胞類似產(chǎn)品：：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞

Medical University of Graz-Chordoma 1細胞類似產(chǎn)品：：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞

190PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞

MGH-U3 (RN)細胞類似產(chǎn)品：：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞

A-875細胞類似產(chǎn)品：：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞

NCI-HUT-520細胞類似產(chǎn)品：：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞

D-341細胞類似產(chǎn)品：：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞

G-361細胞類似產(chǎn)品：：U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞

NB19細胞類似產(chǎn)品：：IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞

H-2347細胞類似產(chǎn)品：：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞

SW948細胞類似產(chǎn)品：：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞

NCI-H1299細胞類似產(chǎn)品：：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞

Pt K1 (NBL-3)細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞

IGROV-1細胞類似產(chǎn)品：：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞

MGSMC細胞類似產(chǎn)品：：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞

NF639細胞類似產(chǎn)品：：MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞

Neuro 2a細胞類似產(chǎn)品：：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞

BT-325細胞類似產(chǎn)品：：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞

BC-024細胞類似產(chǎn)品：：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞

KYSE-150細胞類似產(chǎn)品：：BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞

OE33:人食管腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

RPMI 8402細胞類似產(chǎn)品：：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞

NCI-HUT-69細胞類似產(chǎn)品：：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞

OVCAR.5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞

HCC0827細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞

B-3細胞類似產(chǎn)品：：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞

HEK-293A細胞類似產(chǎn)品：：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞

Th17細胞類似產(chǎn)品：：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞

QGY細胞類似產(chǎn)品：：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞

TM-4細胞類似產(chǎn)品：：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞

U373-MG細胞類似產(chǎn)品：：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞

CHG-5細胞類似產(chǎn)品：：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞

Ramos.G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞

U251細胞類似產(chǎn)品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞

N1E115細胞類似產(chǎn)品：：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞

WM 2664細胞類似產(chǎn)品：：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞

SUDHL-8細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞

NCIH1694細胞類似產(chǎn)品：：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞

BA/F3細胞類似產(chǎn)品：：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞

Panc02細胞類似產(chǎn)品：：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞

C22細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞

Potorous tridactylus Kidney 2細胞類似產(chǎn)品：：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞

ARO細胞類似產(chǎn)品：：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞

MCA 205細胞類似產(chǎn)品：：SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞

KYSE 450細胞類似產(chǎn)品：：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

HB611細胞類似產(chǎn)品：：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞

KYSE-70細胞類似產(chǎn)品：：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞

CCRF CEM細胞類似產(chǎn)品：：ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞

SKRC 39細胞類似產(chǎn)品：：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞

HCT_116細胞類似產(chǎn)品：：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞

3T3-Swiss albino細胞類似產(chǎn)品：：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞

H2126細胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞

RMG-I細胞類似產(chǎn)品：：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞

COV-362細胞類似產(chǎn)品：：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞

130 T細胞類似產(chǎn)品：：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞

H716細胞類似產(chǎn)品：：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞

H596細胞類似產(chǎn)品：：GA-10(Clone 4)細胞、HNE-1細胞、HT29細胞

OCI-Ly 7細胞類似產(chǎn)品：：H220細胞、QBC-939細胞、Hs832.Tc細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、SNU398細胞

C6細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞

ssMCF7細胞類似產(chǎn)品：：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞

CMT167細胞類似產(chǎn)品：：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞

OVCAR 433細胞類似產(chǎn)品：：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞

TN5B14細胞類似產(chǎn)品：：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞

Hs281T細胞類似產(chǎn)品：：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞

EJ細胞類似產(chǎn)品：：Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞

NCM460細胞類似產(chǎn)品：：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞

H-1703細胞類似產(chǎn)品：：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞

BE(2)C細胞類似產(chǎn)品：：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞

Jiyoye(P-2003)細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞

H-1105細胞類似產(chǎn)品：：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞

2V6.11細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞

H-69細胞類似產(chǎn)品：：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞

MHCC 97-H細胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞

H-2126細胞類似產(chǎn)品：：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞

SU.86細胞類似產(chǎn)品：：TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞

RM-1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞

Hi-five細胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

Hi-five細胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

NCL-H548細胞類似產(chǎn)品：：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞

AHH1細胞類似產(chǎn)品：：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞

L-929細胞類似產(chǎn)品：：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞

SNU886細胞類似產(chǎn)品：：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞

CMT-167細胞類似產(chǎn)品：：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞

AN-3細胞類似產(chǎn)品：：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞

Tb1.Lu細胞類似產(chǎn)品：：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞

beta-TC6細胞類似產(chǎn)品：：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞

293/EBNA-1細胞類似產(chǎn)品：：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞

SKMES1細胞類似產(chǎn)品：：MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞

P3X63細胞類似產(chǎn)品：：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞

MSTO211H細胞類似產(chǎn)品：：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞

Fetal Rhesus Kidney-4細胞類似產(chǎn)品：：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞

Tokyo Medical and Dental university 8細胞類似產(chǎn)品：：CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞

PLC-8024細胞類似產(chǎn)品：：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞

NB4細胞類似產(chǎn)品：：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞

624mel細胞類似產(chǎn)品：：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞

HCC1806細胞類似產(chǎn)品：：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞

AD293細胞類似產(chǎn)品：：T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞

C17.2細胞類似產(chǎn)品：：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞

Panc-1-P細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞

BEL-7402細胞類似產(chǎn)品：：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞

LOU-NH91細胞類似產(chǎn)品：：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞

OE33:人食管腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

D-341Med細胞類似產(chǎn)品：：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞

HPAEpiC細胞類似產(chǎn)品：：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞

CORL23細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞

MDA-MB-134-VI細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞

HCC-78細胞類似產(chǎn)品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

Human Epithelioma-2細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞

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