"DBTRG-05MG:人腦膠質母細胞瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

H-1238細胞類似產品：：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞

LS-411細胞類似產品：：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

TR146細胞類似產品：：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞

NR 8383細胞類似產品：：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HCC1954BL細胞類似產品：：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞

H-2591細胞類似產品：：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞

HRCEC細胞類似產品：：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞

購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完HAO，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內預熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內；２)吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉移到無菌離心管內，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)技術也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程，細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)?？寺　＜毎囵B(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來，所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中Zui核心、Zui基礎的技術。公司是國內Zui大的細胞庫之一，迄今為止，細胞收錄背景資料清晰，活力狀態(tài)良HAO的細胞系達1356株，其中大部分是1999年以來從美國ATCC、德國DSMZ和日本RIKEN等分批次引進的細胞系，是全國Zui權威的細胞庫，為您實驗提供Zui可信賴的細胞。公司立足上海，輻射全國，面向世界，為國內科研細胞實驗做綿薄之力。

DHL5細胞類似產品：：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞

HUVSMC細胞類似產品：：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞

NB9細胞類似產品：：WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞

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Roswell Park Memorial Institute 1788細胞類似產品：：EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞

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Ca759細胞類似產品：：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞

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