"HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

B16-BL6細胞類似產(chǎn)品：：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞

U251細胞類似產(chǎn)品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞

C33-A細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞

REC1細胞類似產(chǎn)品：：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

JROECL21細胞類似產(chǎn)品：：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞

TE-6細胞類似產(chǎn)品：：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞

LAN-5細胞類似產(chǎn)品：：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備：實驗室設(shè)計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

EMT6細胞類似產(chǎn)品：：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞

HOS/MNNG細胞類似產(chǎn)品：：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞

NCI-H1792細胞類似產(chǎn)品：：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞

H2135細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞

hTERT-HPNE細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞

NCI H2106細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞

PC-3M細胞類似產(chǎn)品：：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞

RAW-264.7細胞類似產(chǎn)品：：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞

ssMCF-7細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞

Human Pancreatic Duct Epithelial細胞類似產(chǎn)品：：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞

B-3細胞類似產(chǎn)品：：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞

RBSMC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞

NCI-H2052細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞

WIL2-S細胞類似產(chǎn)品：：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞

SL1細胞類似產(chǎn)品：：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞

JB 6細胞類似產(chǎn)品：：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞

JB 6細胞類似產(chǎn)品：：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞

SNT-8細胞類似產(chǎn)品：：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞

J-111細胞類似產(chǎn)品：：Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞

RPMI-2650細胞類似產(chǎn)品：：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞

Hopkins-92細胞類似產(chǎn)品：：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞

MCA205細胞類似產(chǎn)品：：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞

Y3-Ag 1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞

HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

H-1573細胞類似產(chǎn)品：：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞

A875細胞類似產(chǎn)品：：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞

T2 (174 x CEM.T2)細胞類似產(chǎn)品：：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞

NK92MI細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞

Tca-8113細胞類似產(chǎn)品：：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞

Central Adrenergic TH-expressing a細胞類似產(chǎn)品：：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞

HNE-2細胞類似產(chǎn)品：：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞

NCIH2066細胞類似產(chǎn)品：：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞

SNU387細胞類似產(chǎn)品：：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞

SupB15WT細胞類似產(chǎn)品：：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞

MDCC-MSB-1細胞類似產(chǎn)品：：C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞

MPASMC細胞類似產(chǎn)品：：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞

Caco-2 BBe細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞

TR 146細胞類似產(chǎn)品：：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞

NCI-H1651細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞

CATH-a細胞類似產(chǎn)品：：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞

NCI-H1404細胞類似產(chǎn)品：：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞

NSH細胞類似產(chǎn)品：：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞

OVCA 432細胞類似產(chǎn)品：：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞

Mouse Forestomach Carcinoma細胞類似產(chǎn)品：：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞

MDA-MB 468細胞類似產(chǎn)品：：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞

C4-2B細胞類似產(chǎn)品：：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞

MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞類似產(chǎn)品：：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞

P3X63 AG 8.653細胞類似產(chǎn)品：：C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞

Natural Killer-92細胞類似產(chǎn)品：：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞

HCC1833細胞類似產(chǎn)品：：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞

KE 37細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞

MDA453細胞類似產(chǎn)品：：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞

LL/2 (LLC1)細胞類似產(chǎn)品：：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞

SKOV-433細胞類似產(chǎn)品：：H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞

Toledo細胞類似產(chǎn)品：：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞

LOU-NH91細胞類似產(chǎn)品：：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞

SKMEL1細胞類似產(chǎn)品：：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞

ARH77細胞類似產(chǎn)品：：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞

MRC-9細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞

MCF12A細胞類似產(chǎn)品：：EST50細胞、P3-X63Ag8細胞、U2OS細胞

HS-940-T細胞類似產(chǎn)品：：Hs940-T細胞、OCI-Ly7細胞、UMC-11細胞

NCI-H1792細胞類似產(chǎn)品：：MA 104細胞、HOS-TE85細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞

LADMAC細胞類似產(chǎn)品：：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞

SN12-PM6細胞類似產(chǎn)品：：Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞

NCI-H810細胞類似產(chǎn)品：：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞

Colo741細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞

SKRC20細胞類似產(chǎn)品：：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞

VAESBJ細胞類似產(chǎn)品：：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞

Human podocyte細胞類似產(chǎn)品：：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞

J774細胞類似產(chǎn)品：：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞

NKT細胞類似產(chǎn)品：：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞

B16/F0細胞類似產(chǎn)品：：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞

AMO1細胞類似產(chǎn)品：：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞

R 1610細胞類似產(chǎn)品：：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞

Vx-2細胞類似產(chǎn)品：：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞

NCI-H165細胞類似產(chǎn)品：：H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞

BT549細胞類似產(chǎn)品：：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞

SHI1細胞類似產(chǎn)品：：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞

EB2細胞類似產(chǎn)品：：CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞

TH1細胞類似產(chǎn)品：：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞

SK-MEL-31細胞類似產(chǎn)品：：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞

SN12C-PM6細胞類似產(chǎn)品：：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞

TMK-1細胞類似產(chǎn)品：：MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞

RIN-14B細胞類似產(chǎn)品：：Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞

KYSE-520細胞類似產(chǎn)品：：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞

HCC-9204細胞類似產(chǎn)品：：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞

HFE-145細胞類似產(chǎn)品：：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞

HGBEC細胞類似產(chǎn)品：：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞

T-47D細胞類似產(chǎn)品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

PG13細胞類似產(chǎn)品：：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞

OVCA5細胞類似產(chǎn)品：：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞

MDAPC2B細胞類似產(chǎn)品：：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞

DHL10細胞類似產(chǎn)品：：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞

AG06814-M細胞類似產(chǎn)品：：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞

BEL7404細胞類似產(chǎn)品：：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞

H-23細胞類似產(chǎn)品：：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞

SW-1783細胞類似產(chǎn)品：：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞

NTERA2D1細胞類似產(chǎn)品：：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞

SCC 9細胞類似產(chǎn)品：：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞

HuH28細胞類似產(chǎn)品：：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞

2B4-L細胞類似產(chǎn)品：：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞

MNNGHOS細胞類似產(chǎn)品：：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞

SNGM細胞類似產(chǎn)品：：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞

JKT1細胞類似產(chǎn)品：：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞

ATN-1細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞

HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

X63-Ag8細胞類似產(chǎn)品：：H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞

NCI-SNU-878細胞類似產(chǎn)品：：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞

Metastatic Variant-522細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞

NCIH526細胞類似產(chǎn)品：：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞

MGH-UI細胞類似產(chǎn)品：：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞

UCLA SO M14細胞類似產(chǎn)品：：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞

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