"HL-60 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原髓細胞白血病細胞

細胞背景資料：該細胞由CollinsSJ從一位患有急性早幼粒細胞性白血病的３６歲白人女性的外周血中分離建立；可自發(fā)分化，或在鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(１%to１.５%)、D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化；PMA刺激后可分泌TNF-α。該細胞具有吞噬活性和趨化反應，癌基因myc陽性，表達補體受體和FcR。

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉移到預熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提GAO未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。

細胞生長：懸浮

Ly10細胞類似產品：：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞

Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞類似產品：：THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞

MGc80-3細胞類似產品：：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞

RPMI-2650細胞類似產品：：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞

H19-7細胞類似產品：：GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞

HL-60 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原髓細胞白血病細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：維持細胞濃度在１×１０５-１×１０６/ml,每２-３天換液１次。

SW626細胞類似產品：：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞

SKRC-52細胞類似產品：：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞

CAL27細胞類似產品：：MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞

Mo 59J細胞類似產品：：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞

SKGT2細胞類似產品：：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HL-60 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原髓細胞白血病細胞

細胞生長特性：懸浮生長

AU 565細胞類似產品：：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞

GM00637F細胞類似產品：：TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞

HRGEC細胞類似產品：：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞

TF1細胞類似產品：：NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞

bEND.3細胞類似產品：：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞

K7M2細胞類似產品：：GM03569D細胞、Pro-Lec1.3C細胞、NCI-H1092細胞

細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇HAO的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋HAO瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。

SK-GT-4細胞類似產品：：6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞

3T3細胞類似產品：：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞

ABE-8.1/2細胞類似產品：：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞

MDA-415細胞類似產品：：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞

NCI-H1048細胞類似產品：：TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞

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MDA-MB-435S細胞類似產品：：Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞

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H-1836細胞類似產品：：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞

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HL-60 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原髓細胞白血病細胞

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SNU-354細胞類似產品：：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞

CD18細胞類似產品：：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞

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NCIH226細胞類似產品：：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞

LA 4細胞類似產品：：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞

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HMO6細胞類似產品：：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞

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HL-60 Cells(贈送Str鑒定報告)|人原髓細胞白血病細胞

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