其實兩種方法都可獲得滿意的效果。關(guān)鍵在于染液的配制，如果非要有個比較，那么水溶伊紅的染色效果更穩(wěn)定，容易掌握，分化寬容度的更大一些，但染色效果沒有醇溶性伊紅鮮艷，而醇溶性伊紅，相比之下染色效果不夠穩(wěn)定，不易掌握，且液體揮發(fā)較快，不太經(jīng)濟，分化也比較困難，特別是對乙醇的濃度要求很高，越精確分化越好，否則會出現(xiàn)分化不夠與分化過度在很短時間內(nèi)發(fā)生的現(xiàn)象，但它染色效果鮮艷，與蘇木素對比清晰。

水溶伊紅

醇溶伊紅

有些病理科采用水溶性伊紅經(jīng)過處理后用乙醇溶解的方法，也可取得較好效果。

方法：將水溶性伊紅溶于蒸餾水中，然后加濃鹽酸10ml，充分?jǐn)嚢?，靜置過夜后過濾。過濾后的沉淀用蒸餾水沖洗二次，再過濾；將沉淀物連同濾紙一起放入溫箱內(nèi)干燥，加95%乙酵1000ml，配成飽和液。使用前鮮用95%的乙醇1:1~2倍稀釋，加人1%~2%冰醋酸。

據(jù)說用此法配制的醉溶性伊紅染色液使用期長，染色速度快。結(jié)合正確的染色方法時，切片分化不易脫色，顏色清晰艷麗，與藍(lán)色的細(xì)胞核對比突出，且長期保存也不易褪色。何實際應(yīng)用中，這樣配制的醇溶性伊紅染色液普遍使用期短、難染色、易褪色等現(xiàn)象，一般認(rèn)為，此種現(xiàn)象一般由以下幾種原因引起的：

1.溶劑種類：醇溶性伊紅幾乎不溶于水和低濃度乙醉：如用純乙酵取代95%乙醇配制染液，也會影響伊紅溶解度，且染色后切片經(jīng)低濃度乙醇分化易脫色。

2.染色液濃度：室溫下醇溶性伊紅在95%乙醇中較難溶解，遠(yuǎn)低于有關(guān)文獻記載的溶解度(0.45g/100ml)，這可能與染料的生產(chǎn)工藝有關(guān)。所以，在室溫下直接配制染色液往往達不到目標(biāo)濃度，切片染色較淡。

3.冰醋酸的量：適量的冰醋酸能使染色液保持比胞質(zhì)等電點略為酸性的環(huán)境（pH比染色體等電點高），從時使胞質(zhì)電離并帶正電，可被帶負(fù)電的伊紅色酸負(fù)離子染色。不加或加入少量冰醋酸，伊紅僅通過滲透成彌散作用很準(zhǔn)染色，而且和組織結(jié)合不牢固，分化后易脫色。加入過量冰醋酸，一方面使染色體也發(fā)生電離帶正電，造成核、質(zhì)對比不清；另一方面抑制了伊紅電離，形成酵溶性伊紅沉淀，導(dǎo)致染色液失效。

4.染色前后處理：蘇木精染核后，切片未采用流水沖洗藍(lán)化，殘存的酸或堿性物質(zhì)易引起伊紅褪色；或者水洗藍(lán)化后，切片直接進入醇溶性伊紅染色液，因短時間內(nèi)乙醇難以置換出組織內(nèi)水分，引起染色不均勻，并且水分被頻繁帶入染色液會使乙醇濃度下降.伊紅溶解度也隨之降低并出現(xiàn)沉淀，染色液失效；再者伊紅染色后，切片先用流水沖洗再入乙醇分化，則和組織尚未極性吸附的色酸負(fù)離子因乙醇入水的張力而脫去，結(jié)果切片染色較淡。鑒于上述原因，對醇溶性伊紅的染液配制與染色方法給出以下建議:

5.不用蒸溜水或純乙醇溶解伊紅，以95%乙醇為標(biāo)準(zhǔn)溶劑配制儲備液和染色液。

(1)以飽和儲備液作為濃度標(biāo)準(zhǔn)。為確保儲備液完全飽和，可采用恒溫溫水浴箱或數(shù)控裱片機等水浴加熱設(shè)備，禁用電爐、微波爐對乙醉直接加熱，以免發(fā)生意外。

(2)配制染色液時，切勿攪拌或振蕩有沉淀的儲備液，取其1份按1：1或1:2加入95%乙醇，冰醋酸以1~2滴/100ml為好。

(3)切片藍(lán)化采用流水沖洗，此對于鹽酸乙酵分化或弱堿溶液促藍(lán)者尤為重要。

(4)切片浸染伊紅前，必須先人95%乙醇處理，染色后，直接入85%乙醇分化。

(5)對已經(jīng)產(chǎn)生沉淀的染色液，盡置棄之不用。