小鼠胚胎肝細(xì)胞性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝

細(xì)胞處理

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

培養(yǎng)方法

小鼠胚胎肝細(xì)胞（BNL CL.2）培養(yǎng)步驟

小鼠胚胎肝細(xì)胞（BNL CL.2）培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）DMEM+10%FBS+1%P/S

2）培養(yǎng)條件：Atmosphere:Air,95%;CO2,5%，Temperature:37℃。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

4）Medium Renewal：every 2 to 3 days

種屬

小鼠（Mus musculus）

組織來源

肝臟（Liver）

生長特性

貼壁生長（Adherent）

年齡

胚胎（Embryo）

細(xì)胞形態(tài)

表皮細(xì)胞（Epithelial）

疾病

正常（Normal）

小鼠胚胎肝細(xì)胞 上下游產(chǎn)品信息

上游原料

下游產(chǎn)品

小鼠胚胎肝細(xì)胞 生產(chǎn)廠家

 

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