28920-43-6

152593-04-9

148101-51-3

一般步驟：實施例A73制備Ar2-乙?；?L-賴氨酰-L-纈氨?；?A-氨基甲酰基-Ar-[4-({[(2-{[(3i,51S',7i,8i)-8-羥基-7-{(1￡,3￡)-5-[(21S,35',5i',6i')-5-{[(2Z,41S)-4-羥基-2-烯?；鵠氨基}-3,6-二甲基四氫-2H-吡喃-2-基]-3-甲基戊-1,3-二烯-1-基}-1,6-二氧雜螺[2.5]辛-5-基]乙酰基}肼基)羰基]氧基}甲基)苯基]-L-鳥氨酰胺，乙酸鹽（B222）。 B227步驟1.N2-乙?；?N6-(叔丁氧基羰基)-L-賴氨酸（B223）的合成。向N6-(叔丁氧基羰基)-L-賴氨酸（22.5g，91.5mmol，1當量）和K2CO3（63.1g，0.457mol，5當量）在四氫呋喃/水（200mL/200mL）中的混合物在0℃下加入乙酰氯（8.62g，0.109mol，1.2當量），并將混合物在室溫下攪拌4小時。將混合物真空濃縮以除去四氫呋喃，用2M HCl將水層調節(jié)至pH=1，并用EtOAc（100mL）萃取三次。萃取物用鹽水（100mL）洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到B223（23.1g，87.7%），為黃色油狀物。步驟2.N2-乙酰基-L-賴氨酸鹽酸鹽（B224）的合成。在0℃下，向B223（23.1g，0.080mmol，1當量）的乙酸乙酯（400mL）溶液中，在氮氣下，在乙酸乙酯（250mL）中加入HCl（g）的乙酸乙酯（250mL）溶液。將混合物在室溫下攪拌4小時并過濾。將固體用乙酸乙酯洗滌并真空干燥，得到B224（18.5g，>100%），為白色固體，其不經(jīng)進一步純化而使用。步驟3.N2-乙?；?N6-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-賴氨酸（B225）的合成。在0℃下向B224（8g，35.6mmol，1當量）和NaHCO3（5.99g，71.3mmol，2當量）在丙酮/水（80mL/80mL）中的混合物中加入Fmoc-Cl（9.41g，36.3mmol，1.02當量）在丙酮（80mL）中的溶液，并將混合物在室溫下攪拌2小時。用2N HCl將混合物調節(jié)至pH=3-4，并用乙酸乙酯（100mL）萃取三次。萃取物用鹽水（100mL）洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物（7g），為黃色油狀物。向粗產(chǎn)物中加入二氯甲烷和叔丁基甲基醚（100mL），將懸浮液攪拌30分鐘，然后過濾。將濾餅真空干燥，得到B225（3.25g，22.2%），為白色固體。步驟4.N2-乙?；?N6-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-賴氨酰-L-纈氨酰基-N5-氨基甲?；?N-[4-(羥甲基)苯基]-L-鳥氨酰胺的合成（B226）。在0℃下，向N2-二甲基甲酰胺（20mL）中的B225（1.04g，2.54mmol，1當量）的混合物中加入N-甲基嗎啉（769mg，7.61mmol，3當量），1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺-HCl（632mg，3.30mmol，1.3當量），1-羥基苯并三唑水合物（445mg，3.30mmol，1.3當量）和L-纈氨?；?N5-氨基甲?；?N-[4-(羥甲基)苯基]-L-鳥氨酰胺（來自WO04010957,1.01g，2.66mmol，1.05當量），并在氮氣下，將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物倒入叔丁基甲基醚（300mL）中并過濾。將固體用二氯甲烷（50mL）和水（50mL）洗滌并真空干燥，得到B226（1.87g，95.6%），為白色固體。步驟5.N2-乙酰基-N6-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-賴氨酰-L-纈氨酰-N5-氨基甲?；?N-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-L-鳥氨酰胺（B227）的合成。在0℃下，向N2-二甲基甲酰胺（30mL）中的B226（1.87g，2.43mmol，1當量）和雙-(4-硝基苯基)碳酸酯（2.21g，7.28mmol，3當量）在NN-二甲基甲酰胺（30mL）中的混合物中添加在氮氣下，NN-二異丙基乙胺（313mg，2.43mmol，1當量），并將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物倒入叔丁基甲基醚（50mL）中并過濾。通過制備型HPLC純化固體（1.95g），得到B227（580mg，25.7%），為白色固體。1H NMR（400Hz，DMSO-dg）：10.1（s，1H），8.29（d，2H），8.00（d，1H），7.86（d，1H），7.65（d，2H），7.64（d，1H），7.61（m，4H），7.40（m，2H），7.38（m，4H），7.30（m，3H），6.01（br，1H），5.21（s，2H），4.35（br，1H），4.27-4.15（m，5H），2.96（m，4H），1.98（m，1H），1.82（s，3H），1.65（br，3H），1.43-1.24（m，7H），0.83（m，6H）。步驟6.N2-乙?；?N6-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-賴氨酰-L-纈氨酰-N5-氨基甲酰基-N-[4-({[(2-{[(3R,5S,7R,8R)-8-羥基-7-{(1￡',3￡')-5-[(2S,3S,5R,6R)-5-{[(2Z,4S)-4-羥基-2-烯?；鵠氨基}-3,6-二甲基四氫-2H-吡喃-2-基]-3-甲基戊-1,3-二烯-1-基}-1.6-二氧雜螺[2.5]辛-5-基]乙?；鶀肼基)羰基]氧基}甲基)苯基]-L-鳥氨酰胺（B228）的合成。在室溫下，向B209（8.1mg，0.016mmol，1當量）的NN-二甲基甲酰胺（0.4mL）溶液中加入2,6-二甲基吡啶（7.5μL，0.064mmol，4當量），N,N-二異丙基乙胺（11.3μL，0.064mmol，4當量）和4-NN-二甲基氨基吡啶（2mg，0.016mmol，1當量），然后加入B227（17.8mg，0.019mmol，1.2當量），攪拌反應物5小時。通過反相色譜法（方法A）純化反應，得到B228，為白色固體。產(chǎn)量：5.5mg，0.004mmol，26%。LCMS（方案D）：m/z 1306.1 [M+H]+，保留時間=0.81分鐘。

參考文獻：

[1] Patent: WO2014/68443, 2014, A1. Location in patent: Page/Page column 203; 204